王昕医械内毒素初菌实验.ppt

初始污染菌检验依据 GB 15980规定了一次性使用医疗用品灭菌、消毒前、后的卫生标准。本标准对一次性使用医疗用品(包括灭菌的和消毒的一次性使用医疗用品)生产企业中生产、装配、包装车间等生产过程和生产工人手提出卫生要求的质量控制。其适用于各类一次性使用医疗用品生产企业，也适用于灭菌与消毒服务单位。 初始污染菌检验指标 GB 15980中给出的灭菌与消毒产品的微生物指标——产品初始污染菌数： 灭菌产品管道类内腔≤10cfu/件次，外部≤100cfu/件次 非管道类≤100cfu/件次 敷料类≤100cfu/g 消毒产品≤1000cfu/件次或重量(g) 灭菌与消毒产品均不得检出致病菌 初始污染菌检验指标 GB 15980中给出了灭菌与消毒产品生产、装配、包装车间的微生物指标： 空气细菌总数，灭菌与消毒产品分别≤500cfu和2000cfu/m3 物体表面细菌总数分别≤10和20cfu/cm2 生产工人手细菌总数≤300cfu/每只手 初始污染菌数检测（GB 15980 附录C） 常用采样方法 对可用破坏性方法取 样的医疗用品，如输 液(血)器、注射器、 注射针、透析器及各 类导管等，按中华人 民共和国药典规定执 行 对不能用破坏性方法取 样的特殊医疗用品可用 浸有生理盐水的棉拭子 涂抹采样，被采表面 ＜100 cm2取全部表面； 被采表面≥100 cm2取 100 cm2 敷料类可无菌操作续取 10 g，放入100 mL灭菌 生理盐水中，充分振荡 后取样 常用采样方法 对可用破坏性方法取 样的医疗用品，如输 液(血)器、注射器、 注射针、透析器及各 类导管等，按中华人 民共和国药典规定执 行 对不能用破坏性方法取 样的特殊医疗用品可用 浸有生理盐水的棉拭子 涂抹采样，被采表面 ＜100 cm2取全部表面； 被采表面≥100 cm2取 100 cm2 常用采样方法 对可用破坏性方法取 样的医疗用品，如输 液(血)器、注射器、 注射针、透析器及各 类导管等，按中华人 民共和国药典规定执 行 敷料类可无菌操作续取 10 g，放入100 mL灭菌 生理盐水中，充分振荡 后取样 对不能用破坏性方法取 样的特殊医疗用品可用 浸有生理盐水的棉拭子 涂抹采样，被采表面 ＜100 cm2取全部表面； 被采表面≥100 cm2取 100 cm2 常用采样方法 对可用破坏性方法取 样的医疗用品，如输 液(血)器、注射器、 注射针、透析器及各 类导管等，按中华人 民共和国药典规定执 行 初始污染菌检测方法 产品采集与样品处理 于同一批号的三个包装中抽取,抽样的包装不应有破裂，检验前不得启开 在100级净化条件下用无菌方法打开用于检测的至少3个包装，从每个包装中取样，准确称取10g±1g样品。剪碎后加人到200mL灭菌生理盐水中，充分混匀，得到一个生理盐水样液。液体产品用原液直接做样液。（在chp2015版及GMP2010中所要求的洁净级别已变化，以最新版本为准） 如被检样品含有大量吸水树脂材料而导致不能吸出足够样液时，稀释液量可按每次50mL递增，直至能吸出足够测试用样液。在计算细菌菌落总数与真菌菌落总数时相应调整稀释度。 初始污染菌检测方法 ——操作步骤 取上清液作菌落计数 接种至5个平皿 每个平皿中加入1 ml 样液 将冷却至45℃左右 的熔化的营养琼脂 培养基（国外采用 TSA，这次chp2015 微生物限度的修订 也采纳了此培养基） 15-20mI,倒入每个 平皿内混合均匀 待琼脂凝固后翻转 平皿置35℃士2℃ 培养48h 计算平板上的菌落数 本方法适用于产品初始污染菌与细菌菌落总数(以下统称为细菌菌落总数)检测。 初始污染菌检测方法 ——结果报告 注：当菌落数在100以内，按实有数报告，大于100时采用二位有效数字 如果样品菌落总数超过本标准的规定，应进行复检和结 果报告。 菌落呈片状生长的平板不宜采用；计数符合要求的平板上的菌落，按下式计算结果: Xi=A*K/5 Xi —— 细菌菌落总数，cfu/g或cfu/ml； A —— 5块营养琼脂培养基平板上的细菌菌落总数; K —— 稀释度。 初始污染菌检测方法 ——复检 将留存的复检样品依前法复测2次，2次结果平均值都达到本标准的规定，则判定被检样品合格; 其中有任何1次结果平均值超过本标准规定，则判定被检样品不合格。 15 180 120 1000+ 70 113 84 69 12 12 38 33 46 270 全自动菌落成像分析系统 ESCO生物安全柜 谢谢！ * * * 凝胶法干扰试验溶液的制备 编号 内毒素浓度/被加入内毒素的溶液 稀释用液