动物腺病毒载体的研究进展.pdfVIP

第六次全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 入地了解病原的致病机理，为传染病的预防提供理论依据；同时也为药理学、毒理学等研究领域提供新 的技术平台。第三，生物芯片技术用于病原学研究，可以更多地了解病原在不同条件下基因表达规律， 发现病原新的毒力基因和抗原表位。 参考文献略 中国禽冠状病毒研究概况 孔宪刚 (哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨150001) 食源性人兽共患细菌病的现状、防治对策及研究进展 焦新安 (扬州大学，江苏扬州210095) 动物腺病毒载体的研究进展 秦爱建何秀苗 (扬州大学，江苏扬州210095) 随着现代分子生物学的发展，特别是重组DNA技术的建立，促使各种真核病毒用作载体成为可能。目 前已经发展起来的病毒载体主要有逆转录病毒、SV40、牛乳头瘤病毒、腺病毒及痘苗病毒等载体，在基因 治疗、基因免疫等方面，逆转录病毒和腺病毒载体是比较受推崇的。虽然逆病毒载体转染效率虽高，但滴 度低，所携带DNA长度有限，只能转染增殖期细胞，且随机整合入染色体DNA中，不仅具有一定危险性， 而且可能使DNA发生甲基化而失去功能。重组腺病毒载体基因并不插入受体细胞的基因组，而是以染色体 外长期存在形式表达，故安全性高于逆转录病毒介导的基因治疗，是继逆转录病毒载体后在基因治疗、基 因免疫等方面应用开发得较早的一种基因载体。 血清型，而根据基因组DNA序列至少有6个亚型。 腺病毒作为基因表达载体的研究起源于本世纪六十年代初，当时病毒学家观察到腺病毒基因组可与猴 类病毒40(SV40)基因组杂交，实质上是腺病毒基因组可承载异源性基因。从此以后，腺病毒成为病毒学 和分子生物学的重要研究对象，其基因载体系统也有了突飞猛进的发展。 在各类腺病毒载体的构建研究中，由于人腺病毒载体不仅在体外可以转导一系列的细胞系，而且在体 21 文献综述部分 内能转导非分裂细胞，如肝脏、肾脏、肌肉(骨骼和心脏的)、呼吸系统、支气管．卜皮组织和神经系统， 从这些组织建立的细胞系也能被腺病毒载体高效转导。最近又有研究表明，腺病毒载体能高效感染主要抗 原提呈细胞(APC)之一，即树突状细胞。使得腺病毒作为基因转移载体的潜力大大增加，特别是对Ad2 和Ad5载体的研究。目前人腺病毒载体已经用于人类多种基因治疗的临床试验中，同时也是应用得最广泛 的病毒载体之一。腺病毒载体构建主要是将外源DNA插入腺病毒基因组中，通常插入的同时缺失El区或 白质。对于病毒的存活而言，El或E3区的缺失并不影响ITR或包装信号。此外，在相应细胞系的辅助下， 还出现了纤维蛋白基因的缺失性载体，甚至是缺失所有的病毒编码基因的载体。这些载体可归纳为三种类 型：复制缺陷型、辅助依赖型／无肠型、选择复制型。目前已构建的人腺病毒表达载体有多种，如人Ad2、 腺病毒也在与人类腺病毒相似的领域进行了大量的研究，并取得了较大进展。 1 牛腺病毒载体的构建 基础上，首次在BAd3 Wu等为了改变BAV3对人细胞系转导效 而且插入基因的转录是在BAd3晚期启动子的控制下完成的。Qiaohua 对各类人细胞系的转导能力比普通的BAV载体高3—67倍，改变了BAV3对各类人细胞系的嗜性。从试验结果 可以推测，以BAd3为基础的表达载体将在牛的重组疫苗中且有独特的运用潜力，很可能适用于作为人类细 胞中转基因的载体。 coli 与Mittal不同的是，为了提高分离重组病毒的效率，他们选用原代胎牛视网膜(PFBR)细胞并通过E 的高效同源重组机制将外源基因引入到质粒上的BAd基因组中，获得质粒