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精子形态对体外受精—胚胎移植治疗结局影响 　　【摘要】 目的：探讨正常形态精子百分率对体外受精-胚胎移植（ IVF-ET）治疗结局的影响。方法：回顾分析于本中心接受治疗的238个IVF-ET周期，根据WHO推荐的Diff-Quik染色方法及评价标准进行精子形态学分析，共分为3组：A组：5%0.05），三组患者的受精率、2PN受精率、多精受精率、2PN卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、着床率、妊娠率、流产率、多胎率等均无显著性差异（P0.05）。结论：当正常形态精子百分率5%时，精子形态对常规IVF的治疗结局没有影响。 【关键词】 体外受精-胚胎移植； 精子形态； 临床结局 研究显示，不孕不育患者呈逐年上升的趋势，而男方因素占不孕症病因的比例约为25%～40%[1]，因此正确评估男性不育患者的生育力十分重要。精液分析是评价男性生育力最客观和最直接的检测方法，而精子形态能够从很大程度上反映精子功能，是指导临床诊断及治疗方案的一项非常重要的精液参数[2]，但由于染色方法及评判标准方面存在的差异，精子形态学分析对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）结局的预测价值始终存在争议[3，4]。为了更深入了解正常形态精子百分率对常规体外受精治疗结局的影响，本研究采用《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》第4版[5]推荐的精子形态学分类标准，对在本中心接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗的238例患者的男方精液进行严格的形态学评估，回顾性分析精子形态与IVF-ET结局之间的关系。 1资料与方法 1.1研究对象 选择2009年3月至2011年12月在我中心接受IVF-ET治疗的不孕不育患者238例，不孕病因主要为女方输卵管因素或男方少、弱、畸精子症，其中原发不孕101例，继发不孕137例。女方平均年龄（32.9±4.2）岁，不育年限（4.3±2.9）年，男方平均年龄（34.4±5.6）岁。共完成238个取卵周期，217个移植周期。 1.2方法 1.2.1主要试剂①精子形态学检查：Diff-Quik快速染色法试剂盒购自深圳华康生物医学工程有限公司。②体外受精和胚胎培养：ASP，MOPS，G-IVF，G1，G2，HSA-solution及Sperm Grad等培养液均为瑞典Vitrolife公司产品。 1.2.2精液分析男方禁欲2～7d，以手淫法取精于洁净的专用取精杯中，待其液化后按照《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》第4版[5]标准进行精液常规分析及精子形态学分析。精子形态学分析采用Diff-Quik试剂进行染色，100倍油镜下观察不少于200个精子并进行形态评估，分别记录正常形态、头部畸形、颈部及中段畸形和尾部畸形精子的个数，最后计算出正常形态精子占全部计数精子的百分率。所有标本的精液分析及精子形态学分析均由1名技术人员人工操作完成。 1.2.3控制性促排卵超排卵方法按照本中心常规方案，当有2个以上优势卵泡直径达到20mm时，注射绒毛膜促性腺激素（hCG）250μg，36h后经阴道B超引导下取卵，获得的卵子置于37℃、6%CO2培养箱内待授精。 1.2.4精液处理、体外受精-胚胎移植男方取精后1h之内，采用密度梯度离心及上游法处理精液，处理后置于CO2培养箱中待用。取卵后4～6h，向装有卵子的四孔皿中加入精子，使精子的最终密度为10万条a+b级精子/卵子，置37℃、6%CO2培养箱中进行过夜培养。授精后 16～20h剥除颗粒细胞并观察卵子受精情况。取卵后48h、72h观察卵裂及胚胎发育情况，并进行卵裂期胚胎评级，选择评级较高的胚胎在B超引导下进行胚胎移植。本中心优质胚胎评判标准为：正常受精（2PN）来源，第2天为3～5细胞，第3天为7～9细胞，碎片≤20%，卵裂球大致均一且无多核、空泡等现象。移植后14d验尿和血hCG为阳性，则确诊为生化妊娠；移植后4周超声见妊娠囊则确诊为临床妊娠。 1.2.5分组按正常形态精子百分率将结果分为3组，A组：5%0. 05），见表1。 3讨论 精子质量是IVF治疗成功的关键因素之一，而精子形态是反映精子质量及功能的重要参数之一[6]。研究发现，头部异常的畸形精子由于运动速度慢而无法到达输卵管壶腹部使卵子受精。当精子头部表面缺乏某种细胞表面蛋白时可能会造成顶体的异常，导致精子丧失与卵子透明带结合的能力，进而引发受精失败[7]。另外，体内高水平的活性氧也会促使精子质膜发生过氧化反应，导致精子形态及活力发生异常并影响受精[8]。目前有关精子形态的评定标准和它在体外受精中所起的作用一直存在争议[2，3，4]，有研究[2，9，10]认为精子形态可对IVF结局起预测作用，但是也有不同的观点[4，11]，认为精