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高效液相色谱在药学应用概况与最近进展
高效液相色谱在药学应用概况与最近进展 [摘要] 高效液相色谱法是近年来逐渐兴起的一种高效而快速的分离与分析技术,是现代分离测试的重要方法。目前,高效液相色谱法已被广泛运用于各个领域。因其选择性好、灵敏度高、可准确分析微量组成、分析痕量样品等特点已成为医药学分析领域发展最快捷的分析技术。随着高效液相色谱法的普及,色谱仪也得到了相应的更新与改进,色谱仪也正朝着多样化、自动化、联用技术化等方向发展。本文通过对近十几年来国内发表的具有代表性的相关文章进行分析、整理和归纳,综述了高效液相色谱技术在(中)药学、食品检测、保健品检测等研究领域中的应用和最新研究进展。
[关键词] 高效液相色谱;药学研究;进展
[中图分类号] R91 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)07(c)-0015-03
色谱法(chromatography)又称为色谱分析法、层析法,是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法的作用机制为根据不同物质在不同相态下进行选择性分配,针对流动相对固定相中的混合物进行洗脱,不同的物质会以不同的速度以固定相移动,最终实现分离。本文所研究的高效液相色谱技术(high performance liquid chromatography,HPLC)全程依靠仪器完成。本文对HPLC的特点、类型并对其在药学领域中的应用进行了相关阐述。
1 HPLC在中药学中的应用
中药学的研究是通过不同单味药与复方药的配伍方法及煎煮时间等来发掘中药中化学成分的变化规律与药理联系[1-2]。在实际应用中,最为简捷有效的方法为选取长度足够的色谱柱,设置合适的时间以温和流动相进行洗脱[3-4]。也有资料显示新式的毛细管电色谱在中药成分的分析上表现出极大的优势,其规避了HPLC所有的柱床污染,冲洗方便,分辨率高,集HPLC与脉细管电泳优点于一体,利用了HPLC高效快速、高灵敏度的特点,使成分分析法更为完善,在中药学的研究领域发挥了重要的作用[5]。
1.1 HPLC在中药含量测定方面的运用
雷萍等[6]采用HPLC分离测定了虫草产品中腺苷和虫草素的含量,选取Acquityuplc C18色谱柱,以乙腈-水流动相进行洗脱,基本可在4 min内行基线分离,各组分的浓度与峰面积在1~17.5 μg/ml范围内线性良好。HPLC在中药含量测定方面的研究不胜枚举,但均证明其具有一定的特异性[7-8]。
1.2 HPLC在中药代谢方面的运用
薛璟等[9-10]使用大鼠为标本行体肠灌流实验,采用HPLC检测雷公藤甲素含量,研究不同吸收部位于药物浓度对雷公藤甲素的吸收。实验结果表明各肠段吸收情况为:回肠 0.05)。
2 HPLC在食品检测中的应用
2.1 HPLC在食品添加剂检测中的应用
食品添加剂可以提升食品的色、香、味,延长食物的保藏期限,为日常生活带来了很多乐趣和方便。但是不合理地使用食品添加剂不仅降低食品质量,甚至损害人体健康,如苏丹红鸭蛋事件。目前我国对食品添加剂的使用种类、数量有着严格的限制,严禁添加危害人体健康的添加剂。
2.1.1 甜昧剂 甜味剂可以使被添加食物的甜度增加。一般来说,人工添加的甜昧剂都是没有营养的,最常用的有乙酰磺胺酸钾(安塞蜜)、环己氨基磺酸钠(甜蜜素)、糖精钠等,其中尤以低价格的糖精钠使用范围较广。少量添加甜味剂对人体没有副作用,但是,添加过量将会危害人体健康。丁芳林等[11]采用气、液相色谱联用技术,定量检测果冻等食品中安赛蜜、糖精钠和甜蜜素等甜味剂的含量,结果加样回收率为93.19%~100.90%,相对标准偏差(RSD)为1.05%~2.04%。这种气、液相色谱联用技术,不仅能够在短时间内对果冻中的甜味剂进行定性、定量分析,而且也同样适用于检测饮料中的甜味剂的含量。
2.1.2 防腐剂 防腐剂能够延长食物的保藏时间,有效阻止细菌等微生物的滋生。比较常用的防腐剂有山梨酸、苯甲酸和它们的钠盐等。当前,我国食品企业向食品中添加的防腐剂大都是人工合成的,使用过量会损害身体健康。赵质创等[12]采用甲醇、氨化甲醇、水、80%甲醇和20%甲醇提取糕点中的防腐剂,提取液经C18色谱柱进行分离,用甲醇-乙酸铵溶液进行梯度洗脱,在波长为220 nm处进行检测。检测结果表明,苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、富马酸二甲酯这4种常见防腐剂完全分离开来,且分离效果良好,回收率为84%~106%,变异系数 邬晨阳等[15]用HPLC对牛奶中的残留兽药进行了检测,结果表明此HPLC分析方法能同时测定牛奶中11种兽药的残留量,其中包含7种磺胺类药物和4种氟喹诺酮类药物,且灵敏度高、重现性好、准确度高,可满足动物
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