高效液相色谱法同时测定动物饲料中4种雌激素.docVIP

高效液相色谱法同时测定动物饲料中4种雌激素 　　摘要：采用反相高效液相色谱法同时测定动物饲料中的4种雌激素（雌酮、雌三醇、炔雌醇、己烯雌酚）。检测条件为色谱柱Kromasil C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相甲醇-水（60∶40，V/V），流速1 mL/min，检测波长279 nm，柱温25 ℃。结果表明，4种雌激素成分在0.02～200 μg/mL浓度范围内与其对应峰面积呈良好线性关系。样品平均加标回收率为92.4%～109.3%，RSD为2.4%～3.4%，饲料中4种雌激素的检出限为0.010～0.030 mg/kg。该法操作简便、灵敏度高，可同时检测动物饲料中4种雌激素含量。 关键词：高效液相色谱法；雌激素；动物饲料 中图分类号：O657.72 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）12-2907-02 Determination of Four Estrogens in Animal Feeds by HPLC YU Xiao1，ZHAI Hai-yun1，LIN Hai-dan2，ZHAO Chun-hua1，LU Qi-wen1，PAN Yu-fang1 （1. Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006，China； 2. Guangdong Institute of Veterinary Drug and Feedstuffs Control， Guangzhou 510230，China） Abstract： The simultaneous determination method of four estrogen （estrone， estriol， ethiny， diethylstilbestrol） in animal feeds were established by RP-HPLC with Kromasil C18（4.6 mm × 250 mm，5 μm） column at 25 ℃. The mobile phase consisted of methanol-water （60∶40，V/V）. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was set at 279 nm. The results revealed that there were good linear responses in the range of 0.02～200 μg/mL of 4 estrogens， and LODs were 0.010～0.030 mg/kg. The average recoveries were 92.4%～109.3% with RSD of 2.4%～3.4%. Consequently， the method was simple， sensitive for quality control of these estrogens in animal feeds. Key words： HPLC； estrogen； animal feeds 饲料安全是动物性食品安全的重要环节，近年来，由饲料安全问题引发的食品安全事件时有发生。在饲料和动物饮用水中非法添加的雌激素能促进机体的代谢、生长、发育和繁殖。雌激素在动物体内一般难以降解，人食用后可在人体内（主要是内脏、血液中）积累，扰乱内源雌激素的正常作用，诱发癌症、早熟、女性男性化和男性女性化等症状，其毒性还可通过母体胎盘和母乳传给后代，对人类健康危害极大[1]。我国农业部176号文件明确禁止在动物饲料和饮用水中添加雌激素。目前激素分析技术主要包括气相色谱-质谱联用法[2]、高效液相色谱法[3，4]、液相色谱-质谱联用法[5，6]等。本试验建立了高效液相色谱同时测定动物饲料中4种雌激素（雌酮、雌三醇、炔雌醇、己烯雌酚）的方法，该方法将为动物饲料中上述4种雌激素的检测提供参考。 1 材料与方法 1.1 材料 市售鸡、猪、虾、鱼配合饲料。 1.2 试剂与仪器 色谱纯甲醇，购于Dima公司；去离子水；其余试剂均为分析纯。雌三醇对照品（批号100935-200701）、炔雌醇对照品（批号100052-200308）、雌酮对照品（批号100849-200501）、己烯雌酚对照品（批号100033-200607）均购于中国药品生物制品检定所。 高效液相色谱仪（LC-10ATvp型输液泵，SCL-10Avp型控制器，二极管阵列检测器，LC Solution色谱工作站，日本岛津）、超声