荧光原位杂交技术及其在医学诊断上的应用-现代生物医学进展.pdfVIP

988 · · 现代生物医学进展 Progress in Modern Biomedicine Vol.12 NO.5 FEB.2012 荧光原位杂交技术及其在医学诊断上的应用* 陈 琦 贾宇臣 王 利 郑源强 ( 010059) 内蒙古医学院分子生物学研究中心 内蒙古呼和浩特 摘要：荧光原位杂交技术是近年来生物学领域发展起来的将经典的细胞遗传学与分子遗传学结合起来一项新技术。该技术具有 广泛的应用潜力，在细胞生物学、分子生物学、医学等众多领域快速发展。本文介绍了荧光原位杂交技术的基本原理和操作方法， 并对该技术目前的发展状况以其在医学诊断上的应用进行了阐述。 FISH 关键词：荧光原位杂交（ ）；癌症；产前诊断；医学诊断 Q343Q75 A 1673-6273201205-988-04 中图分类号： ， 文献标识码： 文章编号： （ ） CHENQi,JIAYu-chen,WANGLi,ZHENGYuan-qiang (ResearchCenterofMolecularBiology,InnerMongoliaMedicalCollegeHohhot010059,China) ABSTRACT: Keywords: ChineseLibraryClassification(CLC):Q343Q75 Documentcode:A ， ArticleID:1673-6273201205-988-04 （ ） 20 60 70 Ⅲ 虽然早在 世纪 年代末 年代初原位杂交技术就已 异重复序列探针，包括α 卫星和卫星 类探针等，杂交靶位常 DNA 1Mbp 经诞生，但是当时采用的是放射性的 探针，存在人身安全 大于 ，不含散在重复序列、与靶位结合紧密、杂交信号强、 及探针处理等问题。直至原位杂交技术开始使用荧光标记 易于检测，常用于检测间期细胞非整倍体和微小标志染色体； DNA fluorescenceinsituhybri- 探针，这才开启了荧光原位杂交（ 第二类是全染色体或染色体区域特异性探针，这类探针由一条 dizationFISH ， ）的时代。荧光原位杂交技术是一种应用荧光物 染色体或染色体上某一区域几个不同核酸片段组成，可由克隆 DNA 质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示 序列位 到噬菌体和质粒上的染色体特异性大片段通过构建文库制备， FISH 置的方法。与传统的放射性标记原位杂交相比， 具有安 由于所得探针片段较小，故杂交时与邻近区域发生重叠及制片 全、快速、经济、灵敏度高、检测信号强、杂交特异性高、能同时 过程中被破坏的可能性较小，常用于中期染色体重组和间期核 显示多种颜色等优点，因此自该技术问世以来，发展迅速，并广 结构分析；第三类是位点特异性探针，这类探针由一个或几个 cDNA 泛应用于分子生物学、医学、细胞遗传学等许多领域。 克隆序列组成，可由 克隆或克隆到大片段插入载体的核 DNA DNA 酸片段制备。主要用于染色体 克隆序列的定位和靶 1FISH 技术的原