比率荧光纳米水凝胶的制备以及在ph探测中的应用-发光学报.pdfVIP

第３１卷　第３期 发　光　学　报 Ｖｏｌ３１ Ｎｏ３ ２０１０年６月 ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＬＵＭＩＮＥＳＣＥＮＣＥ Ｊｕｎ．，２０１０ 文章编号：１０００７０３２（２０１０）０３０３９５０５ 比率荧光纳米水凝胶的制备以及在 ｐＨ探测中的应用 彭洪尚，黄世华 （北京交通大学光电子技术研究所 教育部发光与光学信息重点实验室，北京　１０００４４） 摘要：基于再沉淀方法制备了一种具有比率荧光发射的纳米水凝胶，适用于检测生理范围的ｐＨ值。通过在 聚氨酯水凝胶中引入ｐＨ值指示剂以及具有共振能量传递关系的荧光染料分子，赋予原本非ｐＨ响应和非荧 光型的水凝胶以ｐＨ探测能力。随着ｐＨ值由酸性渐变为碱性，纳米水凝胶的绿色荧光强度逐渐增强，而红色 荧光逐渐减弱。所制备的纳米水凝胶由于具有灵敏度高、亲水性好、稳定性好、响应快以及ｐＨ值检测范围恰 好涵盖了生理ｐＨ值范围（ｐＨ值６～８）等优点，因此在细胞内ｐＨ值探测领域具有广阔应用前景。 关　键　词：纳米水凝胶；ｐＨ探针；比率荧光；共振能量传递 中图分类号：Ｏ４８２．３１；Ｏ６５７．３２　　　ＰＡＣＳ：７８．５５．Ｋｚ　　　ＰＡＣＣ：７８５５　　　文献标识码：Ａ 正特点使得荧光比率测量技术的实际应用更稳 １　引　　言 定、更方便。在本文中，我们制备了新型荧光纳米 ｐＨ值检测在生物、医学等许多领域都占有十 水凝胶，以应用于生理范围的ｐＨ探测。这种纳 分重要的地位。在用于 ｐＨ值检测的多种材料 米水凝胶由非响应性的聚合物组成制备，其 ｐＨ 中，水凝胶由于具有很高的稳定性、生物亲和性以 敏感性只是来源于凝胶中所装载的有机分子。这 及受激反应性（体积随外部刺激发生变化）而备 种纳米水溶胶具有恒定体积，在生物活体探测时 受关注。水凝胶是一种在水相中迅速膨胀的凝胶 不会因扰乱细胞活动而产生人造信号。 体，主要由亲水性的有机聚合物通过共价或者非 ［１，２］ ２　实　　验 共价作用交叉连接而成 。目前多种纳米水凝 胶已经被研制，并用于探测各种分析物。但是，由 聚亚安脂水凝胶（ＰＵ）购自美国Ｃａｒｄｉｏｔｅｃｈ 于目前的纳米水凝胶的探测机制多是基于体积变 公司，溴百里酚兰（ＢＴＢ）、香豆素６（Ｃ６）和尼罗红 化，因此必须集成或依附于微型装置上以适应光 （ＮＲ）购自ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ公司。 ［３，４］ ［５］ 称取一定质量的ＰＵ，在磁力搅拌条件下将其 学 或者电学方法测量 ，结果只能于宏观领 域中进行探测。最近，有研究报道了通过改变纳 溶解到Ｖ（ＣＨＯＨ）∶Ｖ（ＨＯ）＝９∶１的混合溶液 ２ ５ ２ 米凝胶体积与荧光强度的关系而制备了荧光纳米 －６ 中，配制成浓度为５００×１０ 的溶液。然后将ｐＨ ［６，７］ 凝胶 ，并利用此种纳米凝胶实现了细胞水平 探针分子 ＢＴＢ，０．５ｍｇ，Ｃ６，０．５ｍｇ和 ＮＲ，０．０５ ［８］ 上的探测 。我们知道，单一荧光强度的探测灵 ｍｇ共溶于２０ｇ上面所制备的ＰＵ溶液中，使ＰＵ、 敏性会因为探针的分布、浓度以及光电子系统的 ＢＴＢ、Ｃ６和ＮＲ在混合溶液中达到１∶０．０５∶０．０５∶ 随机漂移而受到消弱。基于荧光寿命的测量方法 ０．