天然产物的提取分离鉴定方法总结.pptVIP

3、常见13C-NMR谱类型及特征： ①噪音去偶谱：又叫全氢去偶谱（COM）或宽带去偶谱（BBD）：所有碳信号作为单峰出现 ②选择氢去偶谱（SPD）： 选择性照射特定氢核，分别消除相关碳信号，使峰简化，增高。 ③无畸变极化转移技术（DEPT谱） 不同类型13C信号在谱图上呈单峰形式分别朝上或朝下伸出，易识别。 如COSY谱可以归属相邻H信号，TOCSY谱可以将自旋系统内一组H信号明确地归属；再借助QC谱可以将与之相对应的C信号加以归属；HMBC 谱对于判定成苷位置具有重要意义。 ⑤2D-NMR：COSY、HMQC、HMBC、 NOESY 、TOCSY。 （三）MS： 确定分子量、求算分子式、提供结构信息。 EI-MS（电子轰击质谱）：热不稳定及难于气化的化合物测不到分子离子峰。 FD-MS（场解析电离质谱）：热不稳定、极性大、难挥发化合物测定。 FAB-MS（快速原子轰击质谱）：与FD-MS类似并可给出相应阴离子质谱。 ESI-MS（电喷雾质谱）：类似FAB-MS。 （四）旋光光谱(Optical rotatory dispersion, ORD) 旋光谱的分类： 1、平坦曲线： 正性：短波高 长波低 负性：短波低 长波高 具有光学活性的物质溶液，可使偏振光发生旋转，称为旋光。 用不同波长的偏振光照射光学活性化合物，用波长对比旋光度作图，即得旋光光谱。 2、单纯Cotton曲线： 正Cotton曲线：峰在长波 谷在短波 负Cotton曲线：峰在短波 谷在长波 3、复合Cotton曲线： 多峰多谷 旋光谱的应用： 确定构型 确定构象 d．常见载体：硅藻土：最大吸水量100%以上的水，对于分离物无吸附性能，装柱容易。硅胶：无化学活性 吸水量达到50%时，无吸附作用，应尽量除去硅胶中含有微量铁质，以防止产生吸附作用。 ①正相色谱： 固定相极性流动相极 固定相：水、缓冲液 流动相：氯仿、乙酸乙酯 ②反相色谱：固定相极性流动相极性 流动相：水、甲醇、乙睛 载 体：RP-2、 RP-8 、 RP-18 正、反相层析与被分离成分的洗脱顺序 正相层析:极性小的先洗脱出来，分离极性大的物质，固定采用强极性物质，流动相用弱极性试剂 反相层析:极性大的先洗脱出来 反相则相反 增加流动相的极性：正相层析洗脱时间加快 反相层析洗脱时间变慢 ③加压液相色谱： P20大气压，HPLC； P5 大气压， MPLC； P2大气压， LPLC 3.2.3根据物质吸附力差别 物理吸附：无选择性，吸附与解 吸可逆，如硅胶、氧化铝、活性炭 吸附 化学吸附： 有选择性，吸附牢固 半化学吸附：介于上述二者之间， 如聚酰胺 1、物理吸附：1）基本规律：相似者易吸附 溶质极性 吸附力三要素 溶剂极性 吸附剂活性 硅胶、氧化铝为极性吸附剂，溶质极性大，吸附力强；溶剂极性大，洗脱力强。活性炭为非极性吸附剂，与此相反。 ②极性强弱比较 a 官能团极性：RCOOHAr-OHH2OR-OHR-NH2 RCONH2RCHORCOOR’R-OR’R-XR-H b 官能团相同，极性官能团数目多，极性大。 c ε介电常数越大，极性越强。 极性大小C＞B＞A 1）简单吸附进行物质浓缩与精制： 结晶，重结晶，活性碳脱色、脱臭 活性碳吸附无选择性，对有效成分也可等量吸附 活性碳吸附能力在水中最强 进行半微量操作时，活性碳的量不宜过多 在有微量杂质存在时，活性碳用于精制时，除杂质较为理想 活性碳对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物 大分子化合物＞小分子化合物 2）吸附柱层析用于分离： 主要见于硅胶及Al2O3 （1）??? 吸附剂用量一般样品的30—60倍，对于难分