产胞外多糖的乳酸菌的简便筛选与鉴定 fast screening and identification of exopolysaccharide-producing lactic acid bacteria.pdfVIP

圈田 产胞外多糖的乳酸菌的简便筛选与鉴定” 田丰伟1，丁虎生1，丁纳1，赵建新1，张 灏1’2，陈 卫1 1(江南大学食品学院，江苏无锡，214122)2(江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡，214122) 摘 要 乳酸菌胞外多糖具有优良的功能性质。根据产胞外多糖乳酸菌的性质，开发了茵落拉丝法作为产胞外 多糖乳酸菌的简便初筛方法。以分离菌落在MRs筛选培养基上的拉丝长度为初筛指标，以胞外多糖产量(硫 酸一苯酚法)为复筛指标，从自然发酵酸乳和自然发酵蔬菜中分离得到了3株胞外多糖产量较高的乳酸菌，经 API细菌鉴定系统鉴定，分别被鉴定为短乳杆菌BT0898、植物乳杆菌NYC30和鼠李糖乳杆菌YHOCl37。 关键词 乳酸菌，胞外多糖，筛选，鉴定，菌落拉丝 乳酸菌胞外多糖(extracellularpolysaccharides， 1材料和方法 EPS)是乳酸菌在生长代谢过程中形成的位于细胞壁 外的粘液多糖或荚膜多糖，属于微生物胞外多糖的一 1．1材料 种。乳酸菌胞外多糖对于发酵乳制品形成良好的质 1．1．1样品来源、化学试剂与培养基 构特征起着十分重要的作用，由于乳酸菌EPS作为 待分离含乳酸菌样品为自然发酵牛乳和发酵蔬 生物高分子的特性而能够改善产品的流变学特性，增 菜，所有样品采样后48h内在O℃下送至实验室进行 强产品的稳定性和持水能力，赋予产品良好的口感和 分析。 风味[1~3]。此外研究发现，乳酸菌胞外多糖还具有突 脱脂乳粉购自光明乳业股份有限公司；APl50 50 CH和API 出的生理功能，如抗肿瘤、调理肠道、免疫调节、抗致 CHL试剂盒购自梅里埃(中国)有限 突变、细胞保护和降低血清胆固醇等H’5]。 公司；其他试剂为国产常规生化纯和分析纯试剂。 鉴于具有重要的食品工业应用价值和重要的生 理活性，近年来产胞外多糖乳酸菌受到极大的关注， 选培养基(MR孓s)：将MRS培养基原始配方中的 关于功能性产胞外多糖乳酸菌的开发及其在发酵乳 20．O g葡萄糖改为5．og，并加50．Og蔗糖，其他组 制品中的应用成为国内外学者研究开发的热点，人们 分不变，不加琼脂为MRS筛选液体培养基。E11iker 尝试多种方法筛选开发产胞外多糖的乳酸菌，并对产 琼脂培养基、M17培养基等按照文献配制或购买自 物胞外多糖的结构、理化与功能性质和分子遗传等开 Difco公司㈨。 展研究[6~9]。国内对产胞外多糖乳酸菌的筛选和功1．1．2仪器设备 能性质进行了一些研究，取得了一定的研究结果。但 HettichGm— 是研究深度尚不够，菌种筛选的范围十分有限，有的 sal一32R型冷冻式离心机，德国Andreas bHCo 产胞外多糖菌株来源于国外发酵剂商品，在产品应用 KG公司；UV2loo紫外分光光度计，尤尼 中可能会受到国外知识产权的限制[1“11]。 ledo 文中根据产胞外多糖乳酸菌的性质，首次建立并 GmbH公司；微型旋涡混合仪，上海沪西分析仪 采用了1种简便有效的产胞外多糖乳酸菌的初筛方 器厂；超净工作台，苏州安泰空气技术有限公司；生化 法，结合利用硫酸一苯酚法