Lecture基因芯片(DNAMicroarrays).pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 末端标记：在引物上标记有荧光素，在DNA扩增过程时，使新形成的DNA链末端带有荧光素。 随机插入：选择四种缄机基，使其中一种或几种挂有荧光素，在PCR过程中，带有荧光素的碱基和不带荧光探针的碱基，同时参与DNA链的形成。 11.4样本制备 制备高质量样本是困难的但又是极其重要的，用于基因类型分析的样本是DNA，用于表达研究的样本是cDNA。 样本制备后应进行标记，通常为酶标记、荧光标记和核素标记。最常用标记物为荧光素。 是芯片技术中除方阵构建外最重要的一步 液相中探针与DNA片段按碱基配对规则形成双链反应。 待分析基因在与芯片结合探针杂交之前必需进行分离、扩增及标记。根据样品来源、基因含量及检测方法和分析目的不同，采用的基因分离、扩增及标记方法各异。高度集成的微型样品处理系统如细胞分离芯片及基因扩增芯片等是实现上述目的的有效手段和发展方向。 合适长度的DNA有利于与探针杂交，最好在封闭循环条件下杂交，杂交炉 11.5杂交 是芯片技术中除方阵构建外最重要的一步 杂交条件的选择与研究目的有关，多态性分析或者基因测序时，每个核苷酸或突变位点都必须检测出来，选择杂交条件时，必须满足检测时的灵敏度和特异性。使能检测到低丰度基因，且能保证每条探针都能与互补模板杂交。 通常设计出一套四种寡聚核