基于分子信标及核酸染料SYBRGreenⅠ定量检测土壤中的汞.PDFVIP

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2018-08-18 发布于天津
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基于分子信标及核酸染料SYBRGreenⅠ定量检测土壤中的汞.PDF

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基于分子信标及核酸染料SYBRGreenⅠ定量检测土壤中的汞

43 (FENXI HUAXUE) 8 第卷分析化学研究报告第期 2015 8 Chinese Journal of Analytical Chemistry 1125 ～ 1129 年月 DOI :10． 11895 /j ． issn． 0253-3820． 150122 基于分子信标及核酸染料SYBＲ Green Ⅰ定量检测土壤中的汞 1 ，2 2 1 * 1 翟琨向东山朱俊胡红青 1 ( ， 430070) 2 ( ， 445000) 华中农业大学资源与环境学院武汉湖北民族学院化学与环境工程学院恩施、 (ssDNA) SYBＲ Green ，，摘要利用分子信标单链核酸及核酸染料 Ⅰ 通过同步荧光分析法建立了一种高、 (Hg2+ ) 。， (FAM)，灵敏高选择性土壤汞的定量检测方法在该体系中分子信标的荧光基团设计为荧光胺分 ssDNA ， 4 T 。 Hg2+ ， ssDNA 子信标的环设计为与互补但有个碱基错配的序列在存在时分子信标的环与通 “T-Hg2+ -T ” DNA ，，， ; ，过特异性结合形成双链分子信标的茎被打开荧光基团与猝灭基团分开荧光恢复同时核酸染料SYBＲ Green Ⅰ与双链DNA 作用，SYBＲ Green Ⅰ的荧光信号显著增强。SYBＲ Green Ⅰ与FAM 的最，，，大激发波长与最大发射波长都很接近通过同步荧光分析法检测时两种荧光染料的荧光峰重叠荧光信号增， Hg2+ 。 : pH = 8． 0 ， 50℃ ， 4 min ，强可实现的高灵敏检测体系的最优检测条件为缓冲溶液的孵育温度为孵育缓冲溶液中NaCl 的浓度为30 mmol / L ，SYBＲ Green I 工作液的体积为 100 0L 。在优化条件下，Hg2+ 浓度在 5 × 1010 ～ 4 ． 0 × 108 mol / L ，SYBＲ Green FAM (I ， Hg2+ 时 Ⅰ及总的荧光强度 Δ 为体系在存在和不存在时的荧光 ) Hg2+ (C) ， I = 1． 3949C+ 19． 3596 (Ｒ2 = 0 ． 9976)，