丹参酮ⅡA通过RhoA／ROCK信号通路对压力负荷增加大鼠心肌纤维化的影响.pdfVIP

医学杂志2014年第 30卷第3 367 丹参酮 ⅡA通过 RhoA／ROCK信号通路对 压力负荷增加大鼠心肌纤维化的影响 蔡辉 常文静 赵凌杰 赵智明 董晓蕾 沈思钰 摘要 目的：研究丹参酮 ⅡA(Tan1IA)通过抑制RhoA／ROCK信号通路对压力负荷增加大鼠心肌纤 维化的影响。方法：选择 SD大鼠6O只，采用腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加大鼠心肌 纤维化模型．动 脉 夹闭4周后 ，将存 活大鼠 40只随机分成假 手术组 (Sham组 )、模 型组 (Model组 )、TanIIA低 剂量组 [L—rranⅡA组 ，10mg／(kg·d)]、Tan11A高剂量组[H—TanⅡA组，20mg／(kg·d)]及阳性对照药物卡托普 利组[Captopril组，100mg／(kg·d)]，每组 8只。8周末检测心脏质量指数、左心室质量指数、心肌组织病 理学、心肌羟脯氨酸 (HYP)含量、心肌 RhoA、ROCK1、转化 生长因子一p1(TGF—p1)和结缔组织生长因子 (CTGF)蛋 白的水平。结果：与 Sham组比较 ，Model组大 鼠心脏质量指数 、左心室质量指数、HYP、RhoA、 ROCK1、TGF—p1和 CTGF蛋 白水平明显升高 (P0．05或P0．01)：与 Model组比较 ，L—TanⅡA组和 H—Tan11A组上述指标 明显下降(P0．05或 P0．01)。结论 ：Tan1IA通过抑制 RhoA／ROCK信号通路． 从而降低下游促纤维化细胞因子的分泌，减少压力负荷增加大 鼠心肌 纤维化反应 ，为心肌纤维化治疗提供 新的依据。 关键词 心内膜心肌纤维化症： 丹参酮 ⅡA： 压力负荷 ；促纤维化细胞因子 心肌纤维化是 由于心脏 中细胞外基质的过 1．2 药品与试剂 丹参酮 ⅡA磺酸钠注射剂购 度沉积 ，也是多种心血管疾病共同的主要病理因 自上海第一生化药业有限公司；卡托普利购 自中 素 ，最终导致心脏功能障碍和不可逆性心力衰 美上海施贵宝制药有限公司：羟脯氨酸测定试剂 竭。近年来 ，RhoA／ROCK信号通路在多种心肌纤 盒 、TGF．B1一抗 、CTGF一抗购 自南京凯基生物 维化模型中的发病作用引起人们的广泛重视 [。 科技发展有限公司 ：RhoA一抗购 自博奥森有 限 结缔组织生长因子 (CTGF)和转化生长 因子一Bl 公司：ROCK1一抗购 自SANTA有限公司：辣根过 (TGF一3[1)作为促纤维化细胞因子，可能成为心肌 氧 化 物 酶 标 记 的 IgG 二 抗 、DAB显 色 剂 、 纤维化潜在的治疗靶向[2J。研究[3-4]证明，丹参酮 MaxvisionMT试剂均购 自福州迈新生物技术有限公 ⅡA(TanI1A)能有效地抑制大鼠心脏成纤维细胞 司。 增殖和表型转化 ，减少细胞外基质产生 ，延缓心 1．3 方法 肌纤维化。本研究通过建立腹主动脉缩窄术压力 1．3．1 心肌纤维化模型制备 采用 AnversaP等 负荷增加心肌纤维化模型 ，观察 TanⅡA对压力 所用方法用腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加心 负荷增加诱导的心肌组织 RhoA／ROCK信号通路 肌纤维化模型。大鼠适应性喂养 5d后，术前禁食 以及心肌组织分泌致纤维化细胞 因子 TGF．B1和 12h，自由饮水 ，将手术组用 10％水合氯醛 (0-3 CTGF的影响，旨在评估 Tan1IA在心肌纤维化防 mL／100g)行腹腔注射麻醉，固定 ，剃毛，常规备皮 治中的作用。 消毒后，于剑突下沿腹正中线逐层开腹，在肾动脉 1 材料与方法 上方分离腹主动脉，在肾动脉上方 0