葛根素对前脂肪细胞分化的影响-病原生物学专业毕业论文.pdfVIP

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特另1．I)jI以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名： 签字日期： 逊年—￡月旦日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构 送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论 文。 指导教师签名：一‘匕!V竺一 雾喜篡嘉蓁耋i一 签字日期：竺堕年三月立日 葛根素对前脂肪细胞分化的影响 硕士研究生： 冯雅静 指导教师： 范晓磊教授 指导小组： 黄 敏教 授 张卓然教授 专业名称： 病原生物学 摘 要 目的：肥胖在胰岛素抵抗、2型糖尿病的发病中起关键作用．，抑制 食欲、增加能量消耗有利于2型糖尿病的防治。脂质代谢紊乱和胰岛素 抵抗为2型糖尿病患者的主要特征，也是糖尿病患者易合并心、脑血管 病的主要原因。在临床治疗糖尿病时，由于胰岛素在．脂肪细胞分化及糖 脂代谢中的作用，临床使用胰岛素及促胰岛素分泌剂磺酰脲类药物患者 类药物，通过激活PPAR丫(Peroxisomeproliferators．activatedreceptors T)转录因子，增加胰岛素敏感性的同时，诱导脂肪细胞分化，增加患者 体重。现已证实葛根素可以有效改善2型糖尿病患者胰岛素的敏感性， 在临床上主要作为糖尿病治疗的辅助治疗。葛根素是否对糖尿病患者体 重变化有影响，目前尚不清楚，研究葛根素对糖尿病患者体重的影响情 况，将为进一步阐明其治疗糖尿病的作用机制提供了依据。 方法：将3T3一L1前脂肪细胞以5×10’每孔的浓度接种于6孔培养 板，一天以后可以达到融合。用含10％胎牛血清的DMEM高糖培养液在 天开始加入培养液，直到实验结束，分化lO～12天的细胞用于实验：用 O．1mg／ml油红O染色2小时，倒置显微镜下观察结果，拍摄图片。采 用两步法半定量一逆转录聚合酶链反应(ReverseTranscription Chain Polymerase proliferators．activatedreceptors 鉴定扩增产物，用FX．MAC进行扫描分析。PPAR72的蛋白质免疫印迹 分析，DAB显色液显色，FX．MAC进行扫描分析结果。 结果： 一、前脂肪细胞诱导分化1O天后，空白对照组细胞呈现典型的脂肪 细胞表型，90％以上细胞中富含较大脂滴，而葛根素处理组，仅20--30 ％的细胞出现较大的脂滴，其油红0的着色明显较空白组淡。 二、MTT结果显示，葛根素处理组浓度分别为l O、20、40pg／ml时， 0．0195，与空白对照组相比均为PO．05，差异有统计学意义；葛根素处 理组浓度为80、1 04±0．0149、0．3201±0．0153， 601ag／ml时，OD值为0．31 与空白对照组相比差异无统计学意义。 三、半定量RT-PCR结果分析表明，3T3一L1前脂肪细胞诱导分