虾蟹混养池塘异养菌区系组成及群落结构.pdfVIP

第32卷第2期 水 产 科 学 voI．32N。．2 SCIENCE Feb．2013 2013年2月 FISHERIES 虾蟹混养池塘异养菌区系组成及群落结构 健3 李信书1一，王洪斌1”，陈文慧1，李士虎1，伏光辉3，陈百尧3，安 (1．淮海工学院海洋学院，江苏连云港222005；2．江苏省海洋生物技术 重点实验室，江苏连云港 222005；3．连云港市海洋与水产科学研究所，江苏连云港222044) 摘要：2011年8月对连云港滩涂虾、蟹混养池塘异养细菌区系组成及群落结构进行研究。通过传统 的微生物分离培养方法对虾、蟹混养池塘水环境中的异养细菌进行分离纯化，共获21株细菌。对获得 的菌株进行鉴定和区系组成及群落结构分析。研究证实，虾、蟹混养池塘水体微生物种类丰富，经16S rRNA序列分析确定为弧菌属等8属的细菌，以弧菌属、盐单胞菌属、芽孢杆菌属为优势菌属，分别占 整个群落的31．5％、26．3％、15．8％。 关键词：虾蟹混养；异养细菌；分析 中图分类号：s917．1 文献标识码：A 文章编号：l∞3一111l{ZOl3102一0106‘04 养殖环境中的微生物既是分解者又是水生生 能菌，促进海水养殖监的可持续发展。 物的间接或直接饵料，同时天然水体中异养细菌生 1材料与方法 产量也是该系统生物群落生产量的重要组成部分。 细菌生产及其对腐质碳的矿化作用在水体碳循环 1．1材料 中发挥着重要作用[1]。研究表明，天然水域有时高 1．1．1池塘水样 达86．5％的初级生产量被细菌所消耗并投入再循 2011年8月采于连云港市海洋与水产科学研 环[2]。因此，微生物生态在研究养殖环境的生态系 究所位于连云港大板桥的滩涂梭子蟹和日本囊对 统中占有重要地位。温度、pH、盐度、水中的氮、磷 虾混养池塘，采样深度25cm。 含量都会影响微生物群落和组成。而养殖环境中 1．1．2主要培养基及试剂 微生物的组成又会对养殖生物的健康生长和繁殖 分离纯化采用2216E培养基；蛋白酶筛选培养 造成影响，近年来因致病性细菌和病毒等引起鱼、 20 基(蛋白胨10g，酵母粉6g，NaClg，酪蛋白 虾、海参等疾病的流行，国内外在水产养殖中对水 40g，pH7．2～7．6，琼脂15g，蒸馏水1000mL)； 的生态环境特别是微生物生态环境倍加重视。许 摇瓶发酵培养基(蛋白酶)：胰蛋白胨10g，酵母浸 多研究学者认为细菌性疾病药物防治只是暂时性 20 膏5g，NaClg，脱脂奶粉log，pH7．2～7．6，蒸 手段，生物防治才是解决问题的根本出路[3-5]。 馏水1000 以梭子蟹(Po厂￡“行“5)和日本囊对虾 等分子生物学试剂购自上海生工，其余常用试剂均 (Mars“pP押口e砧5歹口po蹿icMs)或中国明对虾为分析纯试剂。 (FP挖以口加夕P口F“sc^i行P以sis)进行混养是黄海沿岸滩 1．2方法 涂海水池塘重要的养殖模式。异养菌是养殖池塘 1．2．1样品采集： 生态系统的重要组成，它们可