柱前衍生高效液相色谱法测定减肥药中的芬氟拉明.PDFVIP

( ) 第 32 卷 分析化学 FENXI HUAXU E 　研究简报 第 3 期 　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 2004 年 3 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 366～369 柱前衍生高效液相色谱法测定减肥药中的芬氟拉明 翦英红　龙远德 　马言顺　黄天宝 ( 中国科学院成都有机化学研究所 ,成都 610041) 摘 　要 　建立了柱前衍生反相高效液相色谱紫外检测方法用于测定减肥药中的芬氟拉明。样品用三氯甲烷 ( ) 萃取 ,异丙醇转溶 ,再在四氢呋喃中和 60 ℃下 ,用苯异氰酸酯衍生 35 min ,然后用甲醇/ 水 72/ 28 , V/ V 为流 动相和 Kromasil C18分离柱 ,在 240 nm 检测衍生物。方法的线性范围在 2. 52～126 mg/ L ( r = 0. 9994) ,检出 ( ) ( ) ( ) 限和定量限分别为 0. 36 ng S/ N = 3 和 1. 2ng S/ N = 10 ,平均回收率为 98. 4 % ,相对标准偏差 RSD 小于 300 % 。 关键词 　反相高效液相色谱法 ,芬氟拉明 , 柱前衍生 ,苯异氰酸酯 1 　引　　言 α 芬氟拉明是苯乙胺类食欲抑制剂 ,其化学名称为 N乙基 甲基3三氟甲基苯乙胺。美国食品与 ( ) 1 2 ,3 药物管理局 FDA 称 ,它会伤害人体的神经系统 ,使服用者心脏瓣膜出现异常 。国内也报道 服用 芬氟拉明后 ,导致肾功能衰竭和精神障碍。美国 FDA 和国内有关部门都已明确规定禁止在减肥食品和 药物中添加芬氟拉明。为此 ,建立高灵敏度测定芬氟拉明的方法势在必行。 ( ) 4 ～7 已见高效液相色谱法 HPLC 分析芬氟拉明的文献报道 ,采用紫外检测 ,灵敏度不高 ,最低检 出限仅为20. 6 ng 5 。本实验采用苯异氰酸酯柱前衍生和 240 nm 紫外检测方法 ,不仅改善了色谱峰 形 ,而且提高了灵敏度 ,芬氟拉明的检出限下降到 0. 36 ng ,可与采用衍生 - 荧光检测方法的检出限 0. 23 ng 相媲美8 。至今未见采用柱前衍生紫外检测的 HPLC 方法分析芬氟拉明的报道。 2 　实验部分 2 . 1 　仪器和试剂 HPLC 系统由 Waters 6000A 输液泵、481 紫外检测器、996 二极管阵列检测器、7725 进样阀和 HW 色谱工作站组成 ;AS3120 振荡器 ;ZFQ81 旋转蒸发器。 ( ) ( ) 盐酸芬氟拉明标准品 Sigma 公司 , 纯度高于 99 % 。无水四氢呋喃 THF 、甲醇、苯异氰酸酯 ( PIC) 、C