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《动物细胞融合与单克隆抗体》教学设计
一、教学目标
总:举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
(一)知识目标
(1)说明动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。
(2)简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程、方法与原理。
(3)了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说其应用实例。
(二)能力目标
(1)由植物细胞杂交导出动物细胞融合,培养学生知识迁移能力初步培养学生勇于探索,不断创新精神。
(2)单克隆抗体的制备过程、方法与原理
(3)单克隆抗体应用
三、教学难点
单克隆抗体的制备(筛选的方法及必要性理解)与其特异性强的理解(克隆单个杂交瘤细胞,可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体)
四、课前准备 (学案编制、课件制作、教学模式整理)
五、教学过程
(一)情景导入,复习已有知识做好铺垫
1.学生阅读“太空婚礼”新闻报道资料
2002年12月30日, 两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新人”—有液泡的黄花烟草叶肉细胞原生质体和脱液泡的革新一号烟草叶肉细胞原生质体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,两批新人同时在 “产房”—电融合仪内孕育新生命。一段时间后,我国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。对照实验结果表明,细胞融合率大大提高。
2.教师展示“神舟四号飞船” 图片,说明如果这次 “动物细胞婚礼”进展顺利,人们将从杂交瘤细胞的分泌物中提取到乙肝抗体,这将为规划未来空间药厂提供第一手数据。展示几个月后已经长成的“太空烟草”和普通烟草对照图片。
挑战自我:神舟放飞强国梦,你能主持“太空婚礼”中的科研项目吗?
3.帮助学生回忆植物体细胞杂交过程,理解为什么在太空中细胞(原生质体)融合率会大大上升?为什么选用物理法诱导?分析真实实验操作中关键细节:融合后需要筛选、要获得优良性状的杂种植株需要经过鉴定与筛选。
4.让学生填写“太空婚礼”植物科研项目计划书,教师评价
项目 植物体细胞杂交 原理 融合前处理 促融方法 步骤一 步骤二 步骤三 步骤四 用途 (二)学习新知
1动物细胞融合
1.1结合问题阅读课本:什么是动物细胞融合?它相当于植物体细胞杂交过程的哪一步?它们的过程、基本原理、诱导融合方法和意义是否相同?
学生尝试回答后,教师评价。讲解动物细胞融合过程、灭活病毒诱导融合的原理;动物细胞融合概念与意义。
1.2根据体液免疫过程图解,回答相关内容:抗体由什么细胞产生?其化学本质是什么?主要作用?与抗原作用的特点?主要分布在哪里?
1.3阅读资料,讨论相关免疫特异性问题,纠正“一个天然抗原是引起产生一种效应B细胞和一种特异性抗体”的错误认识,抗原决定簇才是引发免疫特异性细胞和物质的基本结构。
抗原决定簇是决定抗原性的特殊化学基团。大多存在于抗原物质的表面,有些存在于其内部,须经处理后才暴露出来。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。教材中所说的抗原分子刺激淋巴细胞,说的也就是抗原决定簇刺激B淋巴细胞,使其分裂分化出特异性的效应B细胞,分泌特异性抗体。
1.4.通过看图分析说明传统抗体的生产方法及缺陷——产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低
2单克隆抗体
2.1单克隆抗体的概念
阅读资料,找出单克隆抗体的概念
人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。
让学生分析“单、“克隆”、“单克隆抗体”的含义。
2.2单克隆抗体的制备
2.2.1请学生根据所学动物细胞融合原理提出单克隆抗体的设计方案
问题:如何大量生产单克隆抗体?小组讨论,请代表发言。
提示:可以通过对B细胞进行动物细胞培养获取单克隆抗体吗?我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?从诱变育种、基因工程、细胞工程等角度有哪些可能的设计思路?
2.2.2介绍1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒极富创造性的实验方案与实验过程步骤,让学生看书上53页单克隆抗体制备过程示意图,分组讨论,单抗制备过程分哪几步?请用箭头把搞乱的代表单克隆抗体制备过程步骤图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是?
2.2.3让学生描述单克隆抗体制备过程步骤,分析包含哪些原理、哪些动物细胞工程技术
2.2.4引导学生分析讨论单克隆抗体的制备过程中的关键问题与方法
问题①注射抗原的目的是什么?②诱导细胞融合的手段有哪些?③若细胞两两融合后,有几种融合情况?④第一次筛选出的杂交瘤细胞为何需进行克隆化培养和专一抗体检测?⑤实际操作中如何进行两次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞?(用选择性培养基进行第一次筛选,有限稀释法培养进行第二次筛选)
2.3单克隆
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