凝结芽孢杆菌的筛选鉴定及抑菌特性的初步研究-中国农业科学.pdfVIP

　 　 第５６卷２０１５年第７期 １　０９１ 文献著录格式： 姚晓红， 吴逸飞， 杨家帅， 等． 凝结芽孢杆菌的筛选、 鉴定及抑菌特性的初步研究 ［Ｊ］． 浙江农业科学， ２０１５， ５６ （７）： １０９１－１０９４． ＤＯＩ£º １０１６１７８／ ｊｉｓｓｎ０５２８⁃９０１７２０１５０７４６ 凝结芽孢杆菌的筛选、 鉴定及抑菌特性的初步研究 １ １ ２ １ １ １∗ 姚晓红 ， 吴逸飞 ， 杨家帅 ， 柳　 永 ， 王　 新 ， 汤江武 （１ 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所， 浙江 杭州　 ３１００２１；２ 杭州科皇饲料有限公司， 浙江 杭州　 ３１１１５） 　 　 摘　 要： 从断奶仔猪肠道、 菜园土壤、 泡菜等不同来源样品中分离获得乳酸菌， 结合形态特征、 生理生化 指标、 １６Ｓ ｒＲＮＡ分子鉴定等方法， 对其进行菌种鉴定和抑菌活性初步分析。 结果表明， 上述不同来源样品中共 分离得到乳酸菌３５株， 经产酸试验和耐酸、 耐胆盐试验的初步筛选后， 确定 １株优良乳酸菌株ＢＦＳ⁃２。 抑菌试 验表明， 菌株ＢＦＳ⁃２对芽孢杆菌的抑制效果较差， 对大肠杆菌等肠道条件致病菌的有较好的抑制效果， 经生理 生化试验和分子鉴定， 菌株ＢＦＳ⁃２为凝结芽孢杆菌。 关键词： 乳酸菌；凝结芽孢杆菌；分离；鉴定 中图分类号： Ｓ １８２　 　 　 文献标志码： Ａ　 　 　 文章编号：０５２８⁃９０１７（２０１５）０７⁃１０９１⁃０４ 　 　 由于耐药性问题， 抗生素在饲料中的应用受到 多种微生物来源中分离耐胆盐和低ｐＨ 的凝结芽孢 严格限制。 而益生菌是一类通过调控动物肠道微生 杆菌菌株， 并对其抑菌特性进行研究， 以期为后期 物区系的平衡， 从而有效促进宿主动物健康和生长 的生产应用提供借鉴。 的微生物活菌制剂， 且对动物和人无毒副作用。 目 １　 材料和方法 前常用的益生菌主要有乳酸菌、 芽孢杆菌等。 乳酸 菌作为益生菌株应用于畜禽养殖已有多年历史， 但 １１　 分离及筛选菌种培养基 其抗逆性较差， 不耐热， 在饲料加工过程中损失较 培养基配方参照文献 ［５］。 大。 因此， 产乳酸的芽孢杆菌成为近年乳酸菌研究 改良ＭＲＳ 培养基。 蛋白质 １００ ｇ， 牛肉膏 的热点。 早在 １９８９ 年， 美国ＦＤＡ公布的４１种可 １００ ｇ， 柠檬酸氢二钠２０ ｇ、 无水乙酸钠５０ ｇ， 用于饲料的安全菌株及１９９２年再次批准的４２种安 酵母膏５０ ｇ， 葡萄糖５０ ｇ， 磷酸氢二钾２０ ｇ， 全蓖株中， 包括 ５ 种芽孢杆菌， 凝结芽孢杆菌 吐温⁃８０ １０ ｍＬ， 硫酸镁０５８ ｇ， 硫酸锰０２５ ｇ， （Ｂａｃａｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ） 排在第 １位。 凝结芽孢杆菌 水１０００ ｍＬ，调ｐＨ值６２～６５， １１５ ℃灭菌２０ ｍｉｎ。 除具有乳酸菌和双歧杆菌等益生功效外， 还兼具有 乳酸菌增殖培养基 （ＹＰＧ 培养基）。 葡萄糖 耐高温、 耐酸和耐胆盐等高抗逆性， 故其作为一种 ５０ ｇ， 蛋白质 ５０ ｇ， 酵母提取物 １０ ｇ， ＣａＣｌ２ ［１］ 新型益生菌而日益为人们所重视 ， 是近年研究 ０１０ ｇ， 琼脂１５ ｇ， 蒸馏水１０００ ｍＬ， 调ｐＨ６８～ 较为热门的益生菌种。 ７０， １１５ ℃灭菌２０ ｍｉｎ。 研究表明， 凝结芽孢杆菌应用于生长肥育猪饲 １２