梨s基因芯片的试制及分子杂交条件的优化-oalib.pdfVIP

园　艺 　学 　报 　2008, 35 (4) : 481 - 486 A cta Horticu lturae Sin ica 梨 S 基因芯片的试制及分子杂交条件的优化 1, 2 1 1 2 1 1 江 　南 , 谭晓风 , 陈　洪 , 王秀利 , 张 　琳 , 曾艳玲 (1 中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室 , 长沙 4 10004; 2 湖南工业大学绿色包装与生物纳米技 术应用湖南省重点实验室 , 湖南株洲 4 12008) 摘 　要 : 为研究寡核苷酸芯片在确定梨品种 S 基因型中的应用价值 , 根据梨 自交不亲和基因的结构特 点设计了部分 S 基因的检测探针 , 并制成寡核苷酸芯片 ; 采用引物 Cy3荧光标记法标记检测样品的 PCR 产 物并进行杂交 , 以检测不同样品的 S 基因型 。结果表明: 通过对不同杂交温度 、杂交时间等的探索获得了 较好的反应条件并用制备的芯片检测了已知 S 基因型的梨样品 , 检测结果与各品种的已知基因型相符 。证 明寡核苷酸芯片检测梨品种的 S 基因型是一种切实可行的检测方法 , 若对芯片进一步完善 , 则在今后梨 自 交不亲和性状的机理研究及梨自交不亲和性状的利用等方面将有着广阔的应用前景 。 关键词 : 梨 ; 自交不亲和性 ; S RN ase基因; 基因芯片 ; 分子杂交 中图分类号 : S 66 12　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2008) 04 048106 Prepara tion of Prototype S RNa se M icroarray and M olecule Hybr id iza tion Cond ition 1, 2 1 1 2 1 1 J IAN G N an , TAN X iaofeng , CH EN Hong , WAN G X iu li , ZHAN G L in , and ZEN G Yanling ( 1 Key L abora tory of N onW ood F ores t P roduct of S ta te F ores try A dm in is tra tion, Cen tra lS ou th Un ivers ity of F ores try and Technolo 2 gy, Changsha 4 10004, Ch ina; Key L abora tory of Green P ackag ing and B iolog ica l N anotechnology, H unan Un ivers ity of Tech nology, Z huzhou, H unan 4 12008, Ch ina) A b stract: To exp lore the app lication of o ligonucleotide m icroarray in iden tification of p ears S genotyp e, som e p robe s for S RN a se detection were de signed according to the structu re character