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第三章 灭菌技术 本章主要内容 热力灭菌工艺验证的有关参数 物理灭菌法 化学灭菌法 教 学 要 求 2个课时 教学目的： 掌握物理灭菌法以及化学灭菌法 熟悉热力灭菌工艺验证的有关参数 灭菌 灭菌是制剂生产制备中的一项重要工艺过程，即指应用物理方法或化学方法将物质中所有的微生物及其芽胞(包括致病的或非致病的微生物)全部杀死或除去，即获得无菌状态的总过程，所应用的灭菌方法称为灭菌法。 热力灭菌工艺验证的有关参数 灭菌验证的微生物指示剂 灭菌方法和相应微生物指示剂 灭菌方法 微生物指示剂 蒸汽 嗜热脂肪芽胞杆菌 干热 枯草杆菌黑色变种 环氧乙烷 枯草杆菌格罗别杰变种 辐射 短小芽胞杆菌 过滤法 细小假单孢杆菌 热力灭菌工艺的有关参数 D值： D=t=2.303/k 一定灭菌温度下被灭菌物品中微生物数减少90%（或降低一个数量级/对数值） 所需时间 Z值：衡量温度对D值影响的参数 F值：F=DT(lgN0-lg10-6) 在一定温度下杀死容器中全部微生物所需的时间 F0值: F0=△t∑10(T-121)/10 相当于121℃热压灭菌时杀死容器中全部微生物所需时间。 一般F0≥12为宜 不同灭菌工艺不同微生物指示剂的D值 微生物指示剂 灭菌工艺 温度(℃) 样品或介质 D值(min) 嗜热脂肪芽胞杆菌 饱和蒸汽 105 5%葡萄糖水溶液 87.8 嗜热脂肪芽胞杆菌 饱和蒸汽 121 5%葡萄糖水溶液 2.4 嗜热脂肪芽胞杆菌 饱和蒸汽 121 注射用水 3.0 枯草芽胞杆菌 干热 170 玻璃瓶 1 枯草杆菌格罗别杰变种 环氧乙烷 600mg/L 硬胶囊 3 短小芽胞杆菌 γ-射线 湿 0.2Mrad γ-射线 干 0.15Mrad 物理灭菌法 物理灭菌法：指采用加热、干燥、辐射、声波等物理手段达到灭菌目的的方法。具体方法下： 干热灭菌法：火焰灭菌法 、干热空气灭菌法 湿热灭菌法：热压灭菌法、流通蒸汽灭菌法、煮沸灭菌法 、低温间歇灭菌法 紫外线灭菌法 微波灭菌法 辐射灭菌法 滤过除菌法 化学灭菌法 ：系指用化学药品来杀灭微生物的方法，同时不应损害制品的质量。 常用的方法有应用化学杀菌剂、气体灭菌法等。 无菌操作法：指在药剂生产的全过程中采用净化和控制在无菌条件下，尽量使产品避免被微生物污染的一种操作方法。 注射剂、海绵剂、外用制剂、蜜丸剂等 物理灭菌法 1.湿热灭菌法 操作：利用饱和水蒸气或沸水进行灭菌 特点：穿透力强，使蛋白质凝固变性；简单可靠；应用最广泛 方法：湿热灭菌法系指利用饱和水蒸气或沸水来杀灭微生物的方法，包括热压灭菌、流通蒸气灭菌、煮沸灭菌和低温间歇灭菌等方法。 物理灭菌法 2.干热灭菌法 火焰灭菌法： 方法：在火焰上直接灼烧 特点：简便可靠 适用：瓷器、玻璃、金属制品 干热空气灭菌法 方法：高温干热空气灭菌，一般180℃1h以上 特点：穿透力弱，温度不均匀，灭菌温度高 适用：耐高温的玻璃、金属制品；不允许湿气穿透的油脂类材料和耐高温的粉末材料 不适于：多数药品、橡胶、塑料制品 焚烧----最彻底的灭菌方法 烧灼----直接用火焰灭菌方法 干烤----加热160-180℃ 2小时 干热灭菌法 湿热灭菌与干热灭菌的比较 同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好 原因 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固 2、湿热的穿透力比干热大 3、湿热的蒸汽有潜热 湿热灭菌法 加压蒸汽灭菌法 最有效的灭菌方法 121 ℃ 20~30分钟 煮沸消毒法 水煮100 ℃ 5分钟(繁殖体)~2小时(芽胞) 流通蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法 水蒸汽100 ℃ 15~30分钟(繁殖体) 反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌 物理灭菌法 1.湿热灭菌法--热压灭菌法 在热压灭菌器内，利用高压饱和水蒸气杀灭微生物的方法。 一般公认为最可靠的湿热灭菌法。 适用于耐热药物及其水溶液、外科敷料、手术器械及用具等物品的灭菌。 常用的热压灭菌器有：手提式热压灭菌器、直立式热压灭菌器、卧式热压灭菌器等。 注意事项：①确保安全：容器能耐压，压力表与温度计灵敏，安全阀正常，排气畅通。②必需用饱和水蒸气，开始使用时排尽冷空气，使压力与温度相符。③准确计算灭菌时间，一般先预热15～2O分钟，再升压和升温，达到预定压力和温度后开始计时。④灭菌结束时，不可快速放气，骤然减压会导致容器爆裂和药液外溢。 热压灭菌温度、压力与时间 温度 绝对压力kPa(kg/cm2) 表压kpa(kg/cm2) 时间(分钟) 115.5 166.72(1.7) 68.65(0.7) 30 121.5 196.14(2.0) 98.07(1.0) 20 126.5 235.37(2.4) 137.0(1.4) 15 物理灭菌法--3.紫外线灭菌