条件性诱导转基因斑马鱼卵细胞的凋亡和消融-华南农业大学学报.pdfVIP

　华南农业大学学报　２０１６，３７（３）：１７２２ ｈｔｔｐ： ｘｕｅｂａｏ．ｓｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ∥ 　　　　　　　　　　 　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｄｏｉ：１０．７６７１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１４１１Ｘ．２０１６．０３．００３　 周　莉，王　芳，刘　春，等．条件性诱导转基因斑马鱼卵细胞的凋亡和消融［Ｊ］．华南农业大学学报，２０１６，３７（３）：１７２２． 条件性诱导转基因斑马鱼卵细胞的凋亡和消融 １，２ １ １ １ １ １ 周　莉 ，王　芳 ，刘　春 ，梁惜梅 ，姜　兰 ，李凯彬 （１中国水产科学研究院珠江水产研究所，广东广州５１０３８０；２上海海洋大学水产与生命学院，上海２０１３０６） 摘要：【目的】构建针对斑马鱼Ｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ卵细胞的可诱导消融品系，并了解其卵巢组织在条件诱导下的去除规律 和特性，为相关领域的应用提供材料基础。【方法】利用Ｔｏｌ２转座系统建立卵细胞特异表达硝基还原酶（Ｎｉｔｒｏｒｅ ｄｕｃｔａｓｅ，ＮＴＲ）的转基因斑马鱼品系；通过定期采样，连续观察、解剖、组织切片等方法研究甲硝唑（Ｍｅｔｒｏｎｉｄａｚｏｌｅ， Ｍｔｚ）对成熟雌鱼外观及卵巢结构的影响；冰冻切片结合 ＴＵＮＥＬ检测，了解条件性诱导对卵巢细胞凋亡的影响。 【结果】获得囊胚细胞具特异荧光标记的转基因鱼，并形成稳定遗传品系。经Ｍｔｚ诱导，该品系成熟雌鱼卵巢结构 逐步退化、萎缩，卵母细胞渐渐消融，提示ＮＴＲ在卵细胞特异表达；检测发现Ｍｔｚ可导致卵细胞的凋亡，推测卵巢的 组织变化为细胞凋亡所致；撤销Ｍｔｚ胁迫卵巢可再生并恢复生育功能，说明卵巢的消融过程是可逆的。【结论】获 得的转基因斑马鱼可通过条件诱导实现卵巢消融与再生。 关键词：斑马鱼；卵巢；卵细胞；消融；ｎｆｓＢ基因；硝基还原酶；甲硝唑 中图分类号：Ｑ９５４．４３　　　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００１４１１Ｘ（２０１６）０３００１７０６ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌｌｙｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓａｎｄａｂｌａｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｚｅｂｒａｆｉｓｈｏｏｃｙｔｅｓ １，２ １ １ １ １ １ ＺＨＯＵＬｉ ，ＷＡＮＧＦａｎｇ，ＬＩＵＣｈｕｎ，ＬＩＡＮＧＸｉｍｅｉ，ＪＩＡＮＧＬａｎ，ＬＩＫａｉｂｉｎ （１ＰｅａｒｌＲｉｖｅｒＦｉｓｈｅｒｉｅｓＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｉｓｈｅｒｙＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０３８０，Ｃｈｉｎａ； ２ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｉｓｈｅｒｉｅｓａｎｄＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１３０６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｏｄｅｖｅｌｏｐａｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｚｅｂｒａｆｉｓｈ，Ｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ，ｌｉｎｅｉｎｗｈｉｃｈｏｏｃｙｔｅａｂｌａｔｉｏｎｃａｎ ｂｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎａｌｌｙｉｎｄｕｃｅｄ，ｓｔｕｄｙｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｏｏｃｙｔｅａｂｌａｔｉｏｎ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｆｕｔｕｒｅｒｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｔｕｄｉｅｓ．【Ｍｅｔｈｏｄ】ＴｈｅＴｏｌ２ｔｒａｎｓｐｏｓｏｎｓｙｓｔｅｍｗａｓｕｓｅｄｔｏｇｅｎｅｒａｔｅａｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｚｅｂｒａｆｉｓｈｌｉｎｅ ｗｈｉｃｈｅｘｐｒｅｓｓｅｄｎｉｔｒｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＮＴＲ）ｅｎｚｙｍｅｕｎｄｅｒｃｏｎｔｒｏｌｏｆｔｈｅｏｏｃｙｔｅｓｐｅｃｉｆｉｃｇｅｎｅｐｒｏｍｏｔｅｒ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｍｅｔｒｏｎｉｄａｚｏｌｅ（Ｍｔｚ）ｏ