枯草杆菌基因重组试验.docVIP

ICS13.100 C 52 化学品毒理学评价程序和试验方法 第30部分：枯草杆菌基因修复试验 Procedures and tests for toxicological evaluations of chemicals Part 30：Bacillus subtilis DNA recombination repairing assay （报批稿） XXXX- XX - XX发布 XXXX- XX - XX实施 前言 根据《中华人民共和国职业病防治法》制定本部分。 GBZ/T 240《化学品毒理学评价的程序和试验方法》现分为以下三十三部分： ——第1部分：总则； ——第2部分：急性经口毒性试验； ——第3部分：急性经皮毒性试验； ——第4部分：急性吸入毒性试验； ——第5部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； ——第6部分：急性皮肤刺激性/腐蚀性试验； ——第7部分：皮肤致敏试验； ——第8部分：鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames试验）； ——第9部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验； ——第10部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验； ——第11部分：体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验； ——第12部分：体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验； ——第13部分：哺乳动物精原细胞/初级精母细胞染色体畸变试验； ——第14部分：啮齿类动物显性致死试验； ——第15部分：亚急性经口毒性试验； ——第16部分：亚急性经皮毒性试验； ——第17部分：亚急性吸入毒性试验； ——第18部分：亚慢性经口毒性试验； ——第19部分：亚慢性经皮毒性试验； ——第20部分：亚慢性吸入毒性试验； ——第21部分：致畸试验； ——第22部分：两代繁殖毒性试验； ——第23部分：迟发性神经毒性试验； ——第24部分：慢性经口毒性试验； ——第25部分：慢性经皮毒性试验； ——第26部分：慢性吸入毒性试验； ——第27部分：致癌试验； ——第28部分：慢性毒性试验合并致癌试验； ——第29部分：毒物代谢动力学试验； ——第30部分：枯草杆菌基因重组试验； ——第31部分：体内哺乳动物骨髓细胞姊妹染色单体交换（in vivo SCE）试验； ——第32部分：精子畸形试验； ——第33部分：神经毒性筛选组合试验。 …… 本部分为GBZ/T 240 的第30部分。 　　本部分起草单位：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、广西职业病防治研究院、山东省职业职业卫生与职业病防治研究院 本部分主要起草人：许建宁、陈晓琴、赛林霖、史晓祎。化学品毒理学评价的程序和试验方法 第30部分：枯草杆菌重组缺陷型重组试验 范围 GBZ/T 240的本部分规定了枯草杆菌重组缺陷型重组试验目的、试验概述、试验方法、数据处理与结果评价、评价报告和结果解释。 本部分适用于检测化学品遗传毒性。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GBZ/T 224 职业卫生名词术语 术语和定义 GBZ/T 224界定的及下列术语和定义适用于本文件。 31 枯草杆菌基因重组试验bacillus subtilis DNA damage or recombination assay 利用一组枯草杆菌重组功能缺陷型（Rec-）与修复功能健全（Rec+）的试验菌株，测定化学物质所诱发的重组缺陷的试验方法。 试验目的 检测化学品的诱变性，预测其遗传危害和潜在致癌作用的可能性。 试验概述 细菌遭受不同类型的DNA损伤，大多数可导致1次～2次的重组修复。重组功能有缺陷（Rec-）的细菌，与修复功能健全（Rec+）的细菌比较，前者可表现出对DNA损伤更敏感，即细菌易遭受生长抑制或死亡。根据这种差异，就能对受试样品是否引起DNA损伤做出评定。 试验方法 受试样品配制 首选水，若受试样品不溶于水，可用二甲基亚砜（DMSO）和丙酮等有机溶剂，这些溶剂单独使用对枯草杆菌几乎没有生长抑制作用, 偶尔出现抑制效应可能是杂质所致。若不能溶解在这些溶剂中时，还可选用乙酸乙酯, 此物虽不能与水任意比混溶，但也可用。 剂量设计 用标准划线法和芽胞法时，随滤纸片上的受试样品随剂量增加，Rec+ 抑制区带的长度及其与Rec－抑制区带长度之比值也增大。只有加适量受试样品时，两者的比值才最高，而且结果也容易判定。因此，对未知毒性的受试样品，首次试验/预试验时建议用高剂量（如配成饱和液的剂量）。重复测试时，则用较低的浓度，以使Rec+菌抑制带长度几乎为零，此时可对结果加以明确判断。 阳性对照 推荐使用以下几种： 克菌丹 (Captan，CAS No.133-06-2) 20 μg/片； 二硝散 (N