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人胰岛素样生长因子1基因的克隆表达及生物-首都医科大学学报
2004 6 Jun. 2004
25 2 Journal of Capital University of Medical Sciences Vol.25 No.2
1
祁雅慧 王雅梅 孙丽翠 司 杨 闫豫东 张静宜 邴国英*
: RTPCR ,1( IGF1) cDNA,
pcDNA3. 1(+ ) , pcDNA/ I
(HUVEC) MTT :
,293 , G418
, IGF1
, IGF1
: ; ;
: 785
1( insulinlike growth HUVEC
factor1,IGF1) pcDNA3. 1( + ) pCRTOPO In
, vitrogen
IGF1, : T aqDNA , T DNA
4
, Promega
[1]
IGF1 TOPO TA Cloning kit Invitrogen
IAquick gel Extraction kit, IAGEN plasmid
, IGF1 mini/ midi kit IAGEN
Medium200 ,
[2] TM
, IGF1 DMEMG418LipofectAMINE
, IGF1 Reagent GIBCOBRL
HyClone
,IGF1 cDNA 1. 2
, 1) : [ 1]
, IGF1 cDNA , 1
(HUVEC) P1/ P2,Hind :
, P1: 5! AAG CTT ATG ATT ACA CCT
293 , G418 ACA GTG AAG AT G CAC ACC 3! ,
, P2: 5! AAG CTT CTA CAT CCT GTA
GTT CTT GTT T CC T GC AC 3!
2) (RTPCR) :
TRIzol RNA,
1 AMV RTPCR cDNA
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