产植酸酶枯草芽孢杆菌ZX―29产芽孢条件优化.docVIP

产植酸酶枯草芽孢杆菌ZX―29产芽孢条件优化 　　摘要：试验研究了产植酸酶枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）ZX-29的芽孢产率及芽孢数量，采用单因素试验和正交试验对该菌产芽孢条件进行了优化。结果表明，该菌摇瓶发酵生产芽孢的最佳条件为：培养基成分：0.5%可溶性淀粉、2.0%蛋白胨、0.10% KH2PO4和0.05% MnSO4H2O；培养条件：pH 8.0、种龄20 h、装瓶量30 mL（250 mL三角瓶）。在此优化条件下，发酵液中该菌株的芽孢数量达到6.4×109个/mL，芽孢产率达到97.61%。 关键词：植酸酶；枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）ZX-29；发酵；芽孢 中图分类号：TQ920.6；Q939.9 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）01-0160-03 Optimization of Spore Production Conditions of Strain of Producing Phytase Bacillus subtilis ZX-29 WANG Shu-xiang，LI Shu-na，LI Hong-ya （College of Life Science， Hebei Agriculture University， Baoding 071001， Hebei，China） Abstract： The sporulation rate and spore quantity of Strain of producing phytase B. subtilis ZX-29 were studied and the spore production process were optimized through single factor experiment and orthogonal experiment. The results showed that the optimal conditions of spore production were 0.5% Sorbitol， 2% Peptone， 0.1% KH2PO4 and 0.05% MnSO4?H2O， initial pH8.0， inoculating 20 h and filling 30 mL/250mL bottle the spore quantity of strain Bacillus subtilis ZX-29 achieves 6.4×109 per mL and the spore production rate achieved 97.61%. Key words： phytase； Bacillus subtilis ZX-29； fermentation； spore 收稿日期：2013-06-19 基金项目：河北农业大学青年科学基金项目（QJ201233） 作者简介：王树香（1977-），女，河北唐山人，实验师，硕士，主要从事农业微生物、生物饲料和生物肥料方面的研究，（电话 （电子信箱）wangshuxiang@hebau.edu.cn。 植酸酶（Phytase）在畜禽饲料生产中使用可解除植酸的抗营养作用，提高饲料中多种矿物元素和蛋白质、氨基酸的可利用性，又能提高植酸磷的利用率，降低粪便磷排泄造成的环境污染[1]。植酸酶对人体吸收营养物质具有明显的促进作用[2]。近年来植酸酶开始应用于植物性食品中，可达到分解植酸、平衡营养的作用[3]。 植酸酶是一类对热敏感的酶类，制粒过程中高温、高压及高含水量可对其产生极大破坏，导致目前商品植酸酶存在价格昂贵、产量低、不耐高温及产品质量不稳定等缺点[4]，因此获得高热稳定性的植酸酶是近年来植酸酶工业的研究热点和难点。在饲用植酸酶方面，筛选到能够直接产耐高温植酸酶的菌株是最佳方法。目前文献报道已分离到的产植酸酶的芽孢杆菌产酶普遍较低，达不到预期用于发酵生产的目的，因此增加芽孢杆菌植酸酶的产量成为目前亟待解决的研究课题之一[5，6]。目前已有关于芽孢杆菌植酸酶产酶条件优化的研究[7-11]，但仍不能达到预期可应用于发酵生产的效果[12]。 近年的研究已证明枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）ZX-29具有安全、高效、耐热的特点。本试验通过单因素试验和多因素试验对B. subtilis ZX-29菌株发酵产芽孢条件进行研究，旨在为其工业化生产提供依据。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 菌株 B. subtilis ZX-29，由河北农业大学制药工程实验室分离筛选。