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生防荧光假单胞菌2P24中EnvZ_OmpR双因子系统克隆与OmpR原核表达

华 北 农 学 报 ·2 0 1 4 ,2 9 ( 3 ) : 4 1 -4 5 生防荧光假单胞菌2P24 中EnvZ /OmpR 双因子 系统克隆与OmpR 原核表达 1 2 3 1 1 2 孙冰 , , , , , 张 伟 段红 李 伟 田 涛 张力 冰 英 群 (1. , 300381 ;2. , 100193 ;3. , 300380) 天津市植物保护研究所 天津 中国农业大学植物病理学系 北京 天津市西青区植物保护站 天津 : Mini-Tn5 2P24 , 2 ,4 (2 ,4-di- 摘要 用 转座子随机突变荧光假单胞菌野生型菌株 得到抗生素 二乙酰基间苯三酚 acetylphloroglucinol ,2 ,4-DAPG) Sesu-25 。 , EnvZ /OmpR 产量提高的突变体 对转座子侧翼序列分析表明 转座子插入到 ompR 。 EnvZ /OmpR , 5. 9 kb DNA 。 双因子系统的反应调节因子 基因 克隆得到包含完整 系统 全长约为 的 片段 该双 因子系统中的envZ 基因和ompR 基因与P. fluorescens F113 的envZ 基因和ompR 基因同源性分别为93% 和96% 。将 ompR pET-22b (+ ) , pET-ompR 。 pET-ompR Escherichia coli BL21 基因克隆到表达载体 中 得到重组表达载体 将 转入 中 BL21-ompR , IPTG OmpR , SDSompR 得到重组菌株 用 诱导表达和亲和柱层析法纯化的 蛋白 经 电泳分析表明 基 因得到成功表达和纯化。 : ; ;EnvZ /OmpR ; 关键词 荧光假单胞菌 随机突变 双因子系统 中图分类号:Q785 文献标识码:A 文章编号:1000 - 7091 (2014)03 - 0041 - 05 Cloning of EnvZ /OmpR Two-component System from Pseudomonas fluorescens 2P24 and Prokaryotic Expression of OmpR

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