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手足口病流行病和病毒学特征 脊髓灰质炎病毒：通过将标本接种至猴子体内，1909年首次鉴定出该病毒，1949年，利用细胞培养的方法增殖病毒，为疫苗的研制奠定了基础。 柯萨奇病毒：1948年在美国纽约Coxsackie镇，将两名麻痹患儿的标本接种至乳鼠体内，分离出来的一组病毒定名为柯萨奇病毒。根据它们在乳鼠上产生的组织病理学变化和在细胞培养上的能力，分为柯萨奇病毒A组和B组。 埃可病毒：1951年在一名无症状的儿童的粪便标本中分离到，在细胞培养上可以造成致细胞病变，但对乳鼠和灵长类动物不致病。 新肠道病毒：后来，新发现的病毒被按照序号命名（69~71），最近，已经命名至111型 人肠道病毒传播方式 环境因素影响经水传播的病原体 造成人肠道病毒感染与流行的因素 临床特征 病毒由口进入胃肠道，潜伏期为3－35天，一般7－14天。 90％的感染为隐性感染 约5％出现流产感染 1％～2％为非麻痹性脊髓灰质炎或无菌性脑膜炎 仅约0.1%出现永久性弛缓性肢体麻痹 极少数发展为延髓麻痹 引起的疾病 麻痹性疾病 – 脊灰病毒是最常见的引起麻痹性疾病的病原体，但 其它病毒有时也可引起，如肠道病毒 71型（EV71） 无菌性脑膜炎 – 所有人肠道病毒都可以引起, 尤其常见于 5岁以下儿童； 脑炎 –典型或者不典型的脑炎可能伴有脑膜炎症状．大 部 分病例恢复后不留后遗症； “不明原因”发热 – 由A组柯萨奇病毒（Cox A16）和EV71引起，但 B组柯萨奇病毒和某些埃可病毒也经常造成暴发； 咽峡炎 – 由 A组柯萨奇病毒引起； 传染性胸膜痛(博恩霍尔姆氏病 ，Bornholm disease) – 通常由B组柯萨奇病毒引起； 人肠道病毒病例死亡时间 手足口病 手足口病Hand-foot-mouth Disease, HFMD 阜阳手足口病“阜阳13例不明原因肺炎死亡病例” 病例高度散发 不具有传染性，可能为感染性疾病 只在一例中发现疹子 以“重症肺炎”为主要临床表现 病情进展迅速， 大部分入院几小时-2天 死亡 病因不明 HFMD引起关注的原因 阜阳不明原因肺炎死亡病原学鉴定 从3月 23至4月29阜阳市死亡病例 (共22例) CoxA16 1957年在加拿大首次报告，新西兰Seddon于1957年最早加以描述，1958年加拿大Robinson从患者粪便和咽拭中分离出CoxA16，同时患者血清抗体有四倍增长,初步查明CoxA16为本病病原； 1959年提出HFMD命名，HFMD在全球广泛流行，无明显的地域分布。 发热, 不适, 咽喉肿痛, 口腔、手、脚侧面及掌心、屁股出现小泡 传染性极高 病程约1周 细胞系 RD细胞，来源于人横纹肌肉瘤细胞 HEp-2细胞，来源于人喉癌上皮细胞 Vero细胞，来源于非洲绿猴肾细胞 可联合使用RD和HEp-2，或者RD和Vero细胞系进行肠道病毒的分离。 联合使用RD、HEp-2和Vero细胞，有助于提高肠道病毒检出率。 实验室诊断方法 病毒分离鉴定 病毒核酸的检测 普通RT-PCR 荧光定量RT-PCR 血清学检测 急性期/恢复期血清中和抗体滴定 ELISA法检测血清IgM和IgG 质量控制 31个省级网络实验室骨干标准化操作技术培训 各网络实验室负责培训地市实验室骨干 标本采集的时间分布、数量和质量的定期核查 职能考核(血清、核酸） 标本复核(血清、核酸） 实验室现场督导和认证 临床、流行病和实验室信息管理 质量保证 质量保证 省级统一核酸检测方法 统一病毒分离方法 (提供用于病毒分离的细胞系RD,HeP2等) 试剂盒（或方法学）的评价 使用组合标本或核酸评价所使用的试剂盒 仪器校对 生物安全柜：每年一次 加样器：每3－6个月一次 温度监测（培养箱） 标准操作规程（SOP） ： 血清学 细胞培养、病毒分离 PCR，RT-PCR，Real time PCR 记录 电子版和实验记录本 标本和病毒的储存 专家组对本实验室的认证评估 病毒疾病常出现的阴性结果分析 五. 中国大陆HFMD流行、现状和趋势 1981年，我国在上海首次报道了HFMD病例 1987年在中国分离到EV71 早期发现的手足口病的病原体主要为Cox A16型。此后，EV