分子生物学复习题（田生礼＆胡章立）.docVIP

分子生物学 （田生礼＆胡章立） 1.DNA复制起始位点的特征是什么？ 答：复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，这个复制起点呈现叉子的形式，被称为复制叉。对一个生物体基因组而言，复制起点是固定的，表现为固定的序列，并识别参与复制起始的特殊蛋白质。 2.DNA二级结构分几类？各类的结构特征是什么？ 答：通常情况下DNA二级结构分成两大类，右手螺旋有A－DNA和B—DNA，左手螺旋有Z－DNA。DNA的水溶液通常为B－DNA，另外A－T丰富的DNA片段常呈现B－DNA。DNA的双链中一条被相应的RNA所取代，就会形成A－DNA。如，在杂交分子或DNA处于转录状态时。B－DNA中的多聚G－C区易形成左手螺旋DNA，即Z－DNA。 其中B－DNA是最常见的DNA构象，而A－DNA和Z－DNA似乎不具有生物活性。 不同螺旋形式DNA分子主要参数比较 双螺旋 碱基倾角/（o） 碱基间距/nm 螺旋直径/nm 每轮碱基数 螺旋方向 A-DNA 20 0.26 2.6 11 右 B-DNA 6 0.34 2.0 10 右 Z-DNA 7 0.37 1.8 12 左 3.核小体的构成成分是什么？染色体是如何被包装的？ 答：核小体：200个左右碱基对的DNA与四种组蛋白结合而成。 （1）H2A、H2B、H3、H4各两个组成八聚体，为核心DNA。 （2）146BP的DNA在外1.75圈。 （3）H1于核心颗粒外20bp处。 （4）两个相邻核小体以0～80bpDNA连接（物种间有差异）。 核小体的形成只是DNA包装成染色体的第一步，当离子强度较高且有H1存在时，大量10nm的纤维状染色质细丝（由核小体串联而成）会盘绕成螺旋管状的粗丝，统称螺线管，每个螺旋包含6个核小体，它是分裂间期染色质和分裂中期染色体的基本组分，并可进一步压缩为超螺旋。 4.染色体的组成成分哪些？组蛋白与非组蛋白的特征有哪些？ 答：基本组成成分：DNA、组蛋白、非组蛋白、少量RNA （1）DNA：不重复序列、中度重复序列、高度重复序列（卫星DNA） （2）组蛋白：富含Arg、Lys碱性AA，带正电荷，与DNA带负电荷磷酸基团相互作用。四种：H1、H2A、H2B、H3及H4。特征：①进化上极端保守（H3、H4H2A、H2BH1②无组织特异性（极少不含H1而含H5③肽链上AA分布不对称④修饰作用：甲基化、乙酰化、磷酸化、ADP核糖基化、H3、H4作用普遍。⑤H5富含Lys，有种特异性，与H1无明显血缘关系。 特征：①进化上的极端保守性；②无组织特异性；③肽链上Aa分布的不对称性；④组蛋白的修饰作用；⑤富含Lys的组蛋白H5。 （3）非组蛋白：序列特异性DNA结合蛋白，包括酶类、骨架蛋白、核孔复合物蛋白及肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白等。①HMG蛋白②DNA结合蛋白③A24非组蛋白，它们也可能是染色质的结构成份。 5.E．coli DNA聚合酶的组成成分及其功能是什么？ 答：E．coli DNA聚合酶由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种组成。 1、都需要模板指导，以dNTP作为底物，且需要3’－OH的引物链，聚合反应方向为5’ (3’。 2、都有3’(5’外切活性，起核对作用。 3、Ⅰ有Ⅱ、Ⅲ无5’(3’外切活性。 4、Ⅰ为单一多肽链，Ⅱ、Ⅲ为亚基酶。 E．coli DNA聚合酶Ⅰ不是复制E．coli 染色体的主要聚合酶，而起了主要的修复作用，在半保留复制中起辅助作用，有5’→3’聚合功能端粒酶是一种核酸蛋白复合体(RNP)结构，能以酶本身的RNA成分上的一个片段(RNA核心)为模板合成端粒重复序列，为染色体的DNA末端加尾，或修补已断裂染色体的末端，维护基因组的遗传稳定性。真核生物的端粒复制是一种无模板的从头复制。端粒酶对端粒的加尾是以其内部的RNA核心序列为模板进行的，不需要染色体末端DNA的模板作用。由于染色体末端重复序列中富G(G—rich)链的5＇→3＇方向总是指向染色体末端，并且比其反向链长出若干个核苷酸，因而其向外突出的3＇端就成了端粒酶识别和结合的位点。端粒酶首先对已有的3＇末端进行识别和结合，然后根据内设RNA 模板，拷贝(逆转录)出互补的DNA链。端粒DNA的G—rich链经过端粒酶“自主性”地延长后，再通过G—G配对使其终端形成回折，这样DNA复制时新链5＇端缺失就可以得到补齐DNA聚合酶Ⅱ相同，最适模板也是链DNA中间有空隙的单链DNA，单链结合蛋白可以提高该酶催化单链DNA模板的DNA聚合作用。DNApolⅢ也有3→5和5→3外切酶活性，但是3→5外切酶活性的最适底物是单链是DNA，只产生5-单核苷酸，不会产生二核苷酸，即每次只能从3端开始切除一个核苷酸。5→3外切酶活性也要求有单链DNA为起始作用底物，但一旦开始后，便可作用于双链区。DNA聚合酶Ⅲ是细