植物基因工程新途径_叶绿体转化.doc

 ·综述与专论· 中图分类号 : Q943 . 2 文献标识码 :A 文章编号 :1002 - 5064 (2001) 04 - 0009 - 05 植物基因工程新途径 :叶绿体转化 A Ne w Wa y of Plant Ge netic Engine e ring : Chlo ropla st Transfo rmatio n 苏 宁 吴燕民 孙丙耀 沈桂芳 SU Ning WU Yan - min SUN Bing - yao SHEN Gui - fang 中国农业科学院生物技术研究所 ,北京 100081 Biotechnology Research Instit ute , CAA S , Beijing 100081 ,China 摘 要 : 在植物基因工程研究中 ,叶绿体是继核转化之后又一新的遗传转化和表达受体 。叶绿体转化体系具有 可同时进行多基因转化 、表达原核性 、超量表达 、后代遗传稳定 、定点整合 、不会产生基因沉默及母性遗传和安全性 好等特点 。本文着重介绍叶绿体转化体系的特点 、国内外研究动态 、存在的问题及未来发展方向 。 关键词 : 叶绿体 ;叶绿体基因组 ;转化 Abtract : Chloroplast p rovides an alternative usef ul plant t ransformatio n system of plant genetic engineering. Plastid t ransformatio n has several advantages : multiple exp ressed genes in a single t ransformatio n event , p ro karyotic system , high exp ressio n , stable t ransformatio n , site - specific int roductio n of foreign genes , absence of gene silencing and good enviro n2 ment safet y due to t he maternal inherence. In t his paper , t he characterizatio ns , recent advances , so me questio ns and it s p rospect of applicatio n of chloroplast t ransformatio n were described. Ke y wo rds : chloroplast ; chloroplast geno me ; tansformatio n 近 20 年来 ,在国内 、外植物遗传工程研究中 ,取 得了许多核转化的可喜成果 ,培育出了多种高产 、优 质和抗逆性强的转基因新品种 。1999 年 ,美国种植 的半数以上玉米 、棉花和大豆是转基因产品 1 。而 与此同时 ,公众对转基因植物的安全性也产生了一 些疑虑和争议 。 争议的焦点之一是转基因植物的环境安全性问 题 ,即转基因植物田间释放后 ,转基因随花粉转移到 环境中 ,是否会造成“基因污染”,打破原有生态种群 的平衡 。研究表明 ,标记基因从转基因作物传到野 生向日葵的频率为 28 %～38 % ,草莓种植园附近 50 米范围内有 50 %的野生草莓含有标记基因2 ; 转 抗除草剂基因油菜与野生型油菜在大田中第一次回 交产生的后代即可表现出抗除草剂特性 3 。 尽管有关试验结果并不足以表明现有的转基因 植物对生态环境有直接危害 ,但对核转化安全性的 担心以及对基因表达水平与稳定性的更高要求 ,促 使人们继续探索和发现新的更为安全和有效的转化 体系 。近几年来叶绿体转化研究的一系列重要进展 已引起人们的普遍关注4 ,本文就该领域的发展作 一概述 。 1 叶绿体遗传转化的特点 在高等植物细胞中 ,除细胞核外 ,叶绿体和线粒 体中也都存在各自的 DNA 。1988 年 Boynto n 等5 首次成功地用野生型叶绿体 DNA 转化了单细胞生 物 - - 衣藻突变体 ,使人们意识到植物叶绿体不仅 是光合作用的重要场所 ,也可以是植物遗传工程的 新的转化和表达受体 。叶绿体作为遗传转化受体具 有如下独特性 。 1 . 1 目的基因转化效率高且后代表达稳定 植物细胞中含有多个叶绿体 ,每个叶绿体中又 含有多个基因组拷贝 。以显花植物为例 ,其每个叶 肉细胞中约有 100 个叶绿体 ,每个叶绿体中又含有 100 多个质体基因组拷贝 。如