二十二碳六烯酸诱导细胞自噬减轻缺血性脑卒中-第三军医大学学报.PDF

１４５２ 　　　　　　　　　　　　　　第三军医大学学报，２０１７，３９（１４）　　 　　　　　　ｈｔｔｐ：／／ａａｍｍｔ．ｔｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　 ＤＯＩ：１０．１６０１６／ｊ．１０００５４０４．２０１６１１２４２ 二十二碳六烯酸诱导细胞自噬减轻缺血性脑卒中神经损伤 １ ２ ２ ２ １ ２ １ １ 孙而艺 ，张　旋 ，杨　阳 ，刘　伟 ，向　欣 ，冯　华 ，杨　华 　　（５５００２５贵阳，贵州医科大学 ；４０００３８重庆， ２ 第三军医大学西南医院神经外科 ） 　　［摘要］　目的　探讨二十二碳六烯酸（ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄ，ＤＨＡ）对大鼠缺血性脑卒中神经损伤 的保护作用及其机制。方法　利用６０只２８０～３３０ｇ成年 ＳＤ雄性大鼠建立永久性局灶脑梗死模型 （ｐｅｒｍａｎｅｎｔｍｉｄｄｌｅｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｙｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，ｐＭＣＡＯ），按随机数字表法分为３组（ｎ＝２０）：假手术组、模型 载体空白组（ｐＭＣＡＯ＋Ｖｅｈ）和模型ＤＨＡ给药组（ｐＭＣＡＯ＋ＤＨＡ）。建模成功后，按预设时间点对动物 体质量、生存时间、神经功能、脑梗体积等大体指标进行评测；利用ＨＥ、Ｎｉｓｓｌ染色对脑组织形态学改变 进行观察；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测神经细胞自噬相关蛋白变化规律。结果　造模后２４、７２ｈ，ｐＭＣＡＯ＋Ｖｅｈ组 动物体质量及生存率较假手术组出现明显下降（Ｐ＜００５），ＤＨＡ给药可明显改善上述指标，但差异无 统计学意义（Ｐ＞００５）；ｐＭＣＡＯ＋Ｖｅｈ组第７天生存率仅为３８％，ＤＨＡ早期干预可使第７天生存率提 高至５２％，但２组差异无统计学意义（Ｐ＞００５），ＤＨＡ可明显改善由疾病模型造成的神经功能，包括认 知、感觉、运动功能，从而获得更高的神经功能分数及更少的平衡木错失（Ｐ＜００５）。建模７２ｈ后ＴＴＣ 染色发现，ｐＭＣＡＯ＋ＤＨＡ组较ｐＭＣＡＯ＋Ｖｅｈ组可减少约１７％的梗死体积（Ｐ＜００５）；ＨＥ及Ｎｉｓｓｌ染色 发现，ＤＨＡ给药可显著减轻皮层梗死区神经细胞的病理性损伤；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ蛋白检测，ＤＨＡ可显著抑 制梗死后ｍＴＯＲ表达（Ｐ＜００１），同时增强ＬＣ３ ／ 表达（Ｐ＜００５）。结论　ＤＨＡ可显著减轻由缺血 Ⅰ Ⅱ 性脑卒中引起的病理性改变，其保护机制可能为负性调控ｍＴＯＲ通路作用从而激活自噬。 　　［关键词］　二十二碳六烯酸；缺血性脑卒中；自噬；神经功能保护 　　［中图法分类号］　Ｒ７４３．３；Ｒ９６９；Ｒ９７７．６ ［文献标志码］　Ａ Ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄａｌｌｅｖｉａｔｅｓｎｅｕｒａｌｉｎｊｕｒｉｅｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｐｅｒｍａｎｅｎｔｆｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａｂｙｉｎｄｕｃｉｎｇａｕｔｏｐｈａｇｙｉｎｒａｔｓ １ ２ ２ ２ １ ２ １ １ ＳＵＮ Ｅｒｙｉ，ＺＨＡＮＧＸｕａｎ，ＹＡＮＧＹａｎｇ，ＬＩＵ Ｗｅｉ，ＸＩＡＮＧＸｉｎ，ＦＥＮＧ Ｈｕａ，ＹＡＮＧ Ｈｕａ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ ２ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕｉｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＧｕｉｚｈｏｕＰｒｏｖｉｎｃｅ，Ｇｕｉｙａｎｇ，５５００２５； Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００３８，Ｃｈｉｎａ） 　　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃａｃｉｄ（ＤＨＡ）ｉｎｒａｔｓ ｗｉｔｈｐｅｒｍａｎｅｎｔｆｏｃａｌｃｅｒｅｂｒａｌｉｓｃｈｅｍｉａａｎｄｅｘｐｌｏ