低氧环境对骨髓间充质干细胞成骨分化影响.doc

低氧环境对骨髓间充质干细胞成骨分化影响 　　【摘 要】1986 年Friedenstein 等首次报道，骨髓标本中的小部分贴壁细胞在培养过程中能够分化成骨细胞，成软骨细胞，脂肪细胞和成肌细胞，而且这些细胞经过20 个培养周期仍能保持其多向分化潜能，我们把这类细胞称之为BMSCs（骨髓间充质干细胞），BMSCs具有分化多方向性的特点，但是在分化过程中，其分化方向受多种因素的影响。本文主要综述低氧环境在骨髓间充质干细胞的成骨分化方向中的影响。 【关键词】骨髓间充质干细胞（BMSCs）；低氧诱导因子21（HIF21）；成骨分化 【中图分类号】R329 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）11-0663-01 1 骨髓间充质干细胞（BMSCs） BMSCs是来源于骨髓基质的一种间充质细胞，具有向多种细胞分化的潜能，在一定的诱导下可向成骨细胞分化并存在于骨髓中，细胞主要包含成纤维样间质干细胞、小的非粒性细胞（循环干细胞， RS21） 、小的粒性细胞（RS22）以及内皮细胞、部分造血干细胞等成分。BMSCs在骨髓中的含量很少，在骨髓的有核细胞中所占比例约为1 /10万，仅为200个/ml，其数量和生长能力与细胞年龄呈显著的负相关。体外培养的BMSCs体积小 ，核浆比大，多呈平行排列生长或漩涡状生长，在细胞生长的对数期，BMSCs的倍增时间约为30 h[1]，其生长受到体内许多因素的调节。 2 缺血/缺氧预适应机制 缺血/ 缺氧预适应是迄今发现的最强的一种内源性保护机制，其具有创伤性和不可预见性，近年来研究揭示，缺血/ 缺氧预适应与低氧诱导因子21 （ hypoxia inducible factor21 ， HIF21） 的活化表达相关密切，比如在现有的研究中表明增加局部HIF21 的表达可明显减轻脏器损伤及改善远期预后。 HIF-21不仅在低氧的生理反应中有作用，而且在正常胚胎发育过程中也起着重要作用。因为其对低氧信号反应具有特异性和敏感性，其在骨缺损局部的缺氧条件下可以稳定表达，加上HIF - 1组织存在和靶基因调控的广泛性（其靶基因包括VEGF、Ang - 1 /2 /4、PDEG及EPO等在内的60多种）， HIF- 21被认为是促血管新生相关基因中最重要的核心转录因子，也是迄今为止发现的低氧相关调控基因中的唯一特异性的缺氧状态活性转录因子[2]。正是以上特点，使得HIF -2 1在影响骨髓间充质干细胞分化的过程中很有意义。 HIF ? 21第一次由Semenza等从人Hep3B 细胞株核提取物中发现，并发现H IF - 21包括HIF-21α和HIF - 21β两个亚基，其中H IF - 21β为基础表达蛋白， 又称芳香烃受体核转运蛋白， HIF- 21α为氧调节蛋白。HIF - 21广泛存在于哺乳动物细胞内，在正常氧浓度条件中， H IF - 21α在细胞内很快被肿瘤抑制蛋白pVHL所识别并被降解。当细胞处于低氧状态时，由于pVHL缺乏，从而导致HIF - 21α聚积，并转运至细胞核内与HIF - 21β生成共聚体，进而获得生理活性。活化的HIF - 21 可调控多种与血管生长、血管张力及干细胞诱导分化等相关的基因， 通过与启动子上的低氧反应元件结合而促进靶基因在mRNA和蛋白质水平表达，诱导生成具有完整生理功能的血管，进一步重建组织缺损区的血供。国外有报道，在局部通过基因沉默或药物抑制PHD，可稳定HIF21 表达， 进而使得脏器损伤减轻[3]。 常氧条件下， HIF21β就在细胞内表达很稳定，缺氧时几乎不被诱导。HIF21α蛋白在常氧时其合成和降解同时发生，且二者趋于动态平衡，几乎不能被检测出，缺氧刺激下HIF21α蛋白迅速增加，复氧时又迅速降解，体现出细胞内存在迅速而完善的对HIF21活性的调节机制。目前的研究证明： 缺氧诱导的HIF21活性至少在mRNA水平、蛋白质水平和HIF21 二聚化水平进行调节，其中最主要发生在蛋白质的水平 ，即通过对HIF21α蛋白的羟化、乙酰化和磷酸化的调节，最后通过影响信号转导途径来提高他的稳定性和增强其转录活性。 3 缺氧与间充质干细胞的关系 间充质干细胞具有强大的自我更新及向多系分化的潜能，可以迅速迁移至损伤的部位（多数为缺血缺氧的环境），从而修复相应的组织。干细胞体外增殖分化的研究通常是在20%O2 的条件下，然而体内氧浓度显著低于此研究值，比如动脉血氧浓度约为12% ，组织的平均氧浓度约为3%， MSC的主要积聚部位骨髓的氧浓度却为为1%- 7% ， 富集干细胞的胚体氧浓度更低，而且经常动态变化，所以说通常所谓的低氧更符合生理状态。 适度的低氧并不引发MSC凋亡，虽然Geng将MSC注射到发生心肌梗塞SCID