均相光激化学发光免疫分析技术的研究进展.pdfVIP

抗原 一抗体的特异性反应而相互接近。在 680nm 的 的一个主要组成部分，蛋 白质 问相互作用网络对调 激光照射下，供体微珠上的光敏剂将周围环境中的 控细胞及其信号有着重要意义。研究蛋 白相互作用 氧气激发为单线态氧分子。当单线态氧分子扩散到 的方法很多，而AlphaLISA技术成为研究蛋 白质问 受体微珠时，与其上的化学发光剂产生一系列化学 相互作用的一种新方法。在丙型肝炎病毒 (HCV) 发光反应，最后将能量传递到铕上，在615nm发射 编码的非结构蛋 白NS5A与亲环蛋 白A之间的相互 波长产生信号。 作用的研究中得到了证明8【】。 2 均相光激化学发光免疫分析技术特点 3．3 AlphaLISA在高通量筛选 中作用 AlphaLISA技术中微珠均为纳米微粒，增加了 高通量筛选 (HTS)是指运用 自动化 的筛选 反应表面积，极大地提高了检测灵敏度；恰当的荧 系统在短时间内、在特定的筛选模型上完成数 以 光波长及时间分辨计数模式，增加了其特异性；检 干计、甚至数以万计样品的活性测试。AlphaLISA 测过程不易受到样本常见干扰物质、pH值、温度 技术在小分子高通量筛选 中应用很广泛 ；同时， 等因素的影响，保证了检测稳定性 [3】。该技术操作 AlphaLISA技术用于受体的激活剂和抑制剂的高通 非常简便，整个实验流程只需要2h，检测的总体 量筛选及对若干个先导化合物的高通量筛选，成功 积为 25ⅡL。 并得到后续实验证实 [9]。 3 国内外的研究现状及应用 3．4 在疾病及病原体诊断中的应用 随着均相光激化学发光免疫分析技术不断优 目前，肺癌是世界范围内死亡率较高的癌症之 化，该技术在生物标志物、激酶及蛋 白：蛋 白相互 一 ， 患者血清 中的糖蛋 白作为检测肺癌的生物标志 作用、疾病检测和高通量筛选中发挥重要作用。 物 日益受到关注，特别是上皮细胞钙粘蛋 白。Chu． 3．1 血清和血浆中蛋 白质、激素、活性酶含量的 1ingweln等人研究表明，使用AlphaLISA技术检测 检测 上皮细胞钙粘蛋白的岩藻糖基化标志物，可诊断出 前列腺特异性抗原是由前列腺上皮细胞产生的 是否患有转移性肺腺癌 [】…。 单链糖蛋 白，检测血清中该单链糖蛋 白的含量在前 甲型肝炎是一种 由甲型肝炎病毒引起的急性传 列腺癌的早期诊断中具有重要作用 4【]。邹丽萍等研 染性疾病。现阶段，甲型肝炎在我国的发病率有所 究表明，AliphaLISA技术检测其含量，具有高的 下降，但是却常有暴发流行，建立一种快速有效 敏感性和精确度，可用于临床检测和基础医学研 的检测方法非常重要。韩俊等研究表 明 [1”：使用 究 。 AlphaLISA技术检测 甲型肝炎病毒，可以快速准确 高血压是 目前威胁人类健康的严重疾病之一， 的诊断出甲型肝炎。 血管紧张素 I在高血压中发挥着重要的作用。 手足 口病是肠道病毒引起的传染病 ，肠道病 ElizabethCauchon等学者研究表明 】，AliphaLISA 毒 71型是引起感染的主要病原。董小平等人研 技术在血浆中能够检测血管紧张素I的含量，用来 究，建立 了基于抗肠道病毒 7l型衣壳蛋 白lIgM 评价临床中或临床前的高血压治疗药的效果。 AlphaLISA检测方法，该方法具有特异性好、灵敏 泛素一蛋 白酶体途径是真核细胞内一种高效的 度高、用量少等优点。 蛋 白降解路径，尤其是E3连接酶己被阐述清楚在 老年痴呆症是一种不可逆的神经组织退化性疾 癌症、炎症和代谢疾病 中参与这个路径 。研究发现， 病 。淀粉样蛋 白是老年痴呆病理中的一个重要致病 E3连接酶活性的失调与多种疾病发生机理有关。 分子，其经蛋 白酶裂解后形成具有神经毒性的淀粉 因此，使用AlphaLISA技术检测该连接酶的含量， 样肽。ChristianeRose等研究表明 l【，传统检测技