环糊精分子呈截头圆锥体状.PPT

临床应用的手性药物，除天然和半合成药物外，人工合成的手性药物仍以外消旋体供药为主。研究表明，药物对映体具有不同的药动学和药效学。而且手性药物的毒性也存在差别。 对映体之间除了对偏振光的偏转方向恰好相反之外，其理化性质是完全相同的，因而在非手性环境中基本无法分离。创造手性环境，构造非对映异构体是实现手性拆分的基础。 ◆本法需高光学纯度的手性衍生化试剂，衍生化反 应往往比较繁琐费时 ◆各对映体衍生化反应的速率有时也不相同 ◆可采用价格便宜、柱效较高的非手性柱 ◆通过适当的衍生化反应可提高检测的灵敏度 ◆衍生化过程中可伴随样品的纯化 * 第十七章 药品质量控制中现代分析方法的进展 二、手性HPLC技术及其应用 二、手性HPLC技术及其应用 二、手性HPLC技术及其应用 根据手性药物拆分方法和机制分为： 柱前手性衍生化法 手性流动相法 手性固定相拆分法 二、手性HPLC技术及其应用 (一) 柱前手性衍生化法（CDR） 对映异构体与手性试剂反应，生成相应的非对映异构体对，也称非对映异构化衍生。衍生化后产物可采用价格便宜、柱效高的非手性柱进行拆分。 二、手性HPLC技术及其应用 二、手性HPLC技术及其应用 柱前手性衍生化的方法仍然是当前手性药物拆分、尤其是生物样品中药物对映体分离和测定的常用方法。 (二) 手性流动相法（CMP） 配基交换型手性添加剂 环糊精类添加剂 手性离子对络合剂 二、手性HPLC技术及其应用 在流动相加入手性添加剂（CMPA），使其与待测物形成非对映异构体复合物，根据其形成复合物的稳定常数的不同以及药物与结合物在固定相上分配的差异而得以分离。 二、手性HPLC技术及其应用 配基交换型手性添加剂 此类添加剂多为氨基酸及其衍生物，与二价金属离子铜、锌、镍等结合，以适当浓度分布于流动相中，然后消旋体共同形成非对映的配位络合物进行拆分。 二、手性HPLC技术及其应用 环糊精类添加剂 环糊精是由吡喃葡萄糖通过α-（1，4）糖苷键连接构成的环状低聚糖，环糊精分子呈截头圆锥体状，边缘排列有许多羟基，内部则是相对疏水的空腔。如果待分析化合物的分子大小与空腔符合，则可形成环糊精包合物。 常用的环糊精主要为β-CD，γ-CD和新型改性CD。 二、手性HPLC技术及其应用 手性离子对络合剂 核电药物能与手性离子对缔合成电中性络合物，即离子对分布于固定相上，其保留特征可采用手性离子对浓度及其种类调节外，同时还可以由外加的手性络合剂控制。 常用手性离子对络合剂有：奎尼，奎尼丁和（+）10-樟脑磺酸等。 (三)手性固定相拆分法（CSP） 二、手性HPLC技术及其应用 根据固定相与对映体之间的相互作用分类： 吸附型 模拟酶移植型 电荷转移型 配体交换型 (三)手性固定相拆分法（CSP） 根据固定相的材料分类： Pirkle型(刷型)手性固定相 蛋白质手性固定相 手性聚合物固定相 环糊精类手性固定相 大环抗生素手性固定相 配体交换手性固定相 冠醚手性固定相 二、手性HPLC技术及其应用 Pirkle型手性固定相 蛋白质类手性固定相 环糊精类手性固定相 手性聚合物固定相 二、手性HPLC技术及其应用 重点讲述： 二、手性HPLC技术及其应用 Pirkle型手性固定相 目前使用量大、适用面广、对手性识别机理揭示较深的一类CSP。 π-碱型（有斥电子取代基）Pirkle 型手性固定相：拆分氨基酸、亚砜类等对映体。 π-酸型（有吸电子取代基）Pirkle 型手性固定相：拆分多种带烷基、醚基、氨基取代的芳香环类对映体。 二、手性HPLC技术及其应用 蛋白质类手性固定相 此类键合相以离子键或共价键以及蛋白交联作用将蛋白质固定到硅胶上。蛋白质是一类高分子聚合物，所含L-氨基酸具有手性特异性，可与药物对映体在蛋白质结合位点进行手性识别而达到分离。 蛋白质手性固定相主要靠氢键及范德华力维持其稳定，可以通过调节流动相缓冲液的组成、PH值和温度来改变手性选择性。 适用于阳离子型化合物。 二、手性HPLC技术及其应用 蛋白质类手性固定相 常用的有：牛血清蛋白（BSA）和α1-酸性糖蛋白(AGP)键合硅胶手性固定相 常用的流动相为磷酸盐缓冲液pH4-7，离子强度为0-500mmol/L，有机改性剂不得超过5%。 二、手性HPLC技术及其应用 环糊精通过分子中较窄端的伯醇羟基与二氧化硅相连。当某些对映体样品进入环糊精手性色谱柱后，分子潜入环糊精的疏水空腔，其极性基团与环糊精分子空腔边缘的羟基发生氢键作用，瞬间形成一系列的包合物，这些包合物存在能量差异使异构体分子在固定相