羧肽酶A1及其活性中心基因的表达及活性分析TheExpressionof.PDFVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 摇 圆园园缘 杂藻责；员圆（猿）：圆园远耀圆员园 ·圆园远 · 悦澡蚤灶 允 悦葬灶糟藻则 月蚤燥贼澡藻则 ［文章编号］摇 员园园苑鄄猿愿缘载（圆园园缘）园猿鄄园圆园远鄄园缘 羧肽酶粤员及其活性中心基因的表达及活性分析 岳乔红，苏明权，杨摇 柳，郝晓柯（第四军医大学西京医院检验科，西安摇 苑员园园猿圆） ［摘摇 要］摇 目的：克隆羧肽酶粤员（糟葬则遭燥曾赠责藻责贼蚤凿葬泽藻粤员，悦孕粤员）全酶及其活性中心基因，构建重组表达载体进行诱导表达，分析 表达产物活性。方法：砸栽鄄孕悦砸扩增悦孕粤员全酶及活性中心基因，测序分析后将目的基因克隆于表达载体责 耘载鄄源栽鄄员，测序证 实插入方向正确后转化大肠杆菌月蕴圆员，陨孕栽 诱导表达目的基因后杂阅杂鄄孕粤 耘 电泳分析。目的蛋白经变性、复性、纯化后酝栽栽 法和集落形成试验鉴定其活性。结果：获得了人悦孕粤员全酶及活性中心基因，目的基因诱导表达后约远远 噪阅及源远 噪阅处可见 新生蛋白带；活性分析显示悦孕粤员全酶和活性中心蛋白都具有一定的催化水解活性，但后者对肿瘤细胞的杀伤效果较弱。结 ：能成功克隆了人悦孕粤员全酶及其活性中心基因，获得了二者的原核表达产物，体外具有一定活性。可望以人羧肽酶粤员全 酶及其活性中心基因为新起点，继续完善优化羧肽酶粤员系统，为抗体靶向治疗前列腺癌的临床应用奠定基础。 ［关键词］摇 羧肽酶粤员；活性中心；原核表达；活性分析 ［中图分类号］摇 砸猿怨圆援员员摇 摇 摇 摇 ［文献标识码］摇 粤 栽澡藻 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 匀怎皂葬灶 悦葬则遭燥曾赠责藻责贼蚤凿葬泽藻 粤员 葬灶凿 陨贼泽 粤糟贼蚤增藻 悦藻灶贼藻则 郧藻灶藻 再哉耘 匝蚤葬燥鄄澡燥灶早 ，杂哉酝蚤灶早鄄择怎葬灶，再粤晕郧蕴蚤怎，匀粤韵载蚤葬燥鄄噪藻（阅藻责葬则贼皂藻灶贼 燥 悦造蚤灶蚤糟葬造蕴葬遭燥则葬贼燥则赠，载蚤躁蚤灶早 匀燥泽责蚤鄄 贼葬造，贼澡藻 云燥怎则贼澡酝蚤造蚤贼葬则赠 酝藻凿蚤糟葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠，载蚤忆葬灶 苑员园园猿圆，悦澡蚤灶葬） ［粤遭泽贼则葬糟贼］摇 韵遭躁藻糟贼蚤增藻：栽燥糟造燥灶藻澡怎皂葬灶糟葬则遭燥曾赠责藻责贼蚤凿葬泽藻粤员葬灶凿蚤贼泽葬糟贼蚤增藻糟藻灶贼藻则早藻灶藻葬泽憎藻造造葬泽糟燥灶泽贼则怎糟贼则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 增藻糟贼燥则 枣燥则 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 遭藻枣燥则藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 贼澡藻蚤则 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽援 藻贼澡燥凿泽：悦孕粤员 葬灶凿 悦孕粤员葬糟贼蚤增藻 糟藻灶贼藻则早藻灶藻 憎藻则藻 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 遭赠 砸栽鄄孕悦砸 枣则燥皂 责葬灶糟则藻葬泽 贼蚤泽泽怎藻，葬灶凿 贼澡藻灶 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 憎葬泽 糟葬则则蚤藻凿 燥怎贼援 栽澡藻 糟燥则则藻糟贼 贼葬则早藻贼 早藻灶藻泽 憎藻则藻 糟造燥灶藻凿 蚤灶贼燥 责则燥噪葬则赠燥贼蚤糟 增藻糟贼燥则 责 耘载鄄源栽鄄员葬灶凿 贼则葬灶泽枣燥则皂藻凿 蚤灶贼燥耘援糟燥造蚤 月蕴圆员遭藻枣燥则藻 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽援 粤枣贼藻则 蚤灶凿怎糟藻凿遭赠 陨孕栽 ，早藻灶藻责则燥凿怎糟贼泽憎藻则藻 葬灶葬鄄 造赠扎藻凿 遭赠 杂阅杂鄄孕粤 耘援 栽葬则早藻贼 藻曾责则藻泽泽藻凿 责则燥贼藻蚤灶泽 憎藻则藻 凿藻灶葬贼怎则葬贼藻凿，则藻灶葬贼怎则葬贼藻凿，责怎则蚤枣蚤藻凿 葬灶凿 藻增葬造怎葬贼藻凿 贼澡则燥怎早澡 酝栽栽 葬灶凿 葬早葬则 糟燥造燥灶赠 枣燥则皂 贼藻泽贼援砸藻泽怎造贼泽：匀怎皂葬灶 糟葬则遭燥曾赠责藻责贼蚤凿葬泽藻 粤员葬灶凿 蚤贼泽 葬糟贼蚤增藻 糟藻灶贼藻则 早藻灶藻憎藻则藻 糟造燥灶藻凿 泽怎糟糟藻泽泽枣怎造造赠援 晕藻憎 藻曾鄄 责藻糟贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶 遭葬灶凿 燥枣 酝则远远，园园园 葬灶凿源远，园园园 葬责责藻葬则藻凿 燥灶 杂阅杂鄄孕粤 耘 葬枣贼藻则 蚤灶凿怎糟藻皂藻灶贼援 月燥贼澡 燥枣 贼澡藻 藻曾责则藻泽泽藻凿 责则燥贼藻蚤灶泽 澡葬增藻 糟葬贼葬造赠贼蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼赠 蚤灶 增蚤贼则燥，遭怎贼 贼澡藻 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 造葬贼贼藻则 蚤泽 蚤灶枣藻则蚤燥则 憎澡藻灶 葬责责造蚤藻凿 贼燥 贼怎皂燥则 糟藻造造泽援 悦燥灶糟