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血吸虫病免疫学检验方法研究 　　摘要：目的：探讨分析血吸虫病的免疫学检验方法。 方法：对目前较为常用的4种血吸虫病的免疫学检验方法进行对比，4种方法分别为皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验，对比4种方法检验的敏感性和各自的优势和劣势。 结果：我们的试验结果显示4种方法检测血吸虫病的阳性率分别为皮内试验94.30%、环卵沉淀试验96.80%、酶联免疫法98.10%、间接血凝试验92.70%，4种方法的阳性率进行比较发现差异不明显，P0.05，不具有统计学意义。 结论：4种方法都具有较高的检查敏感性，但又各具特点，在实际应用中应该灵活结合努力发挥每种方法最大的优势，使其为临床诊断提供更为可靠和准确的结果。 关键词：血吸虫病免疫学检验阳性率临床诊断 【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801（2013）11-0536-02 血吸虫病是一种严重的寄生虫病对人体危害极大，血吸虫的传染源为哺乳类动物，常见的感染情况为人畜共患。感染人群一般都是接触了被污染的疫水、土壤、食物等进而患病[1]。病虫感染宿主后通常会有一段潜伏期，因而临床及时有效的诊断是提高患者治愈率的关键。感染后患者常会出现咳嗽、咯血、发热、嗜酸性粒细胞增加等症状，如果患者静脉壁受损还可能发生血栓。临床诊断时医生除了观察患者的具体症状，还要结合实验室检测、免疫学检测、超声检测等结果做出最终判断[2]。我们对目前较为流行的4种血吸虫病的免疫学检验方法（皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验）进行对比分析，现将结果报道如下。 1资料和方法 1.1背景资料。选取成熟血吸虫的虫卵作为研究对象，由于虫卵内部毛蚴的分泌排泄物抗原性较强，因而可以和血吸虫宿主的血清相作用进而形成特异性的沉淀物质。 1.2试验方法。对目前较为常用的4种血吸虫病的免疫学检验方法进行对比，4种方法分别为皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法和间接凝血试验，具体试验方法如下。 1.2.1皮内试验。按照1∶3000的比例制备新鲜成虫匀浆，使用无菌注射器和皮试针头对受试者进行皮试注射，注射剂量为0.05ml。注射完毕后等待15分钟观察结果，具体为检查受试者的注射部位是否出现丘疹，如果出现要测量其最大直径，最大直径大于或等于1.0cm的为阳性反应。 1.2.2环卵沉淀试验。抽取受试者的血液样本进行离心处理获得血清，用融化的石蜡在干净的载玻片上划2道间距约为20mm的直线，待石蜡干燥后在2道线间滴加2滴受试者的血清。然后再向血清中加入约100个干燥的虫卵混匀，覆上盖玻片并用石蜡密封四周。将玻片置于温箱中培育48小时后在显微镜下观察结果。根据虫卵周围出现的沉淀物的大小进行阳性判断。 1.2.3酶联免疫法。首先制备实验组，使用日本血吸虫可溶性虫卵粗抗原（1∶3000）包被聚苯乙烯板，在4℃的温箱内过夜培育，第二天进行冲洗再加入受试者的血清样本（1∶200，吐温-PBS稀释），按照同样的方法制备对照组，对照组不加血清样本。最后向实验组和对照组中加入底物进行显色处理，并使用酶标比色计读取吸光度值。 1.2.4间接凝血试验。先在U型微量血凝板的第一排的第一孔、第二孔、第三孔和第四孔内分别滴加0.9%的氯化钠溶液，再向第一孔加入血清样本混匀，对第二、三、四孔依次根据递减稀释法进行滴加。在第三孔和第四孔内加入稀释后的致敏红细胞悬液，旋转震摇混匀后在室温下静置1小时后观察记录结果。根据四个孔内的阳性反应情况判断是否为血吸虫病患者。 1.3统计学方法。使用SPSS19.0对所有数据进行处理，统计分析方法使用卡方检验和ANOVA，P0.05，不具有统计学意义。 3讨论 血吸虫病是一种严重的寄生虫类疾病，根据世界卫生组织1995年的统计数据显示，全球受该病威胁的人口达6亿多，其中感染人口接近2亿。可以感染人体的血吸虫主要为曼氏血吸虫、埃及血吸虫、日本血吸虫、间插血吸虫、湄公血吸虫和马来血吸虫等，我国是该病的高发区域，发病人群主要集中在长江流域和南方一些地区[2]。 血吸虫的传染源为哺乳类动物，常见的感染情况为人畜共患，多种因素都可以影响血吸虫病的流行，如气温、水源、土壤、人口流动、社会制度等。一般而言，感染人群都是接触了被污染的疫水、土壤、食物等进而患病。感染后患者常会出现咳嗽、咯血、发热、嗜酸性粒细胞增加等症状，如果患者静脉壁受损还可能发生血栓。临床诊断时医生除了观察患者的具体症状，还要结合实验室检测、免疫学检测、超声检测等结果做出最终判断[3]。 对血吸虫病的免疫学检测通常采用血吸虫尾蚴和虫卵制备抗原，目前较为常见的方法包括皮内试验、环卵沉淀试验、酶联免疫法、间接血凝试验4种方法。我们对4种方法