中药学专业毕业论文 [精品论文] 柑橘类黄酮诺必擂停对k562细胞的体内体外作用及其机制的研究.docVIP

中药学专业毕业论文 [精品论文] 柑橘类黄酮诺必擂停对K562细胞的体内体外作用及其机制的研究 关键词：柑橘类黄酮 诺必擂停 K562细胞 血管内皮生长因子 血管生成 慢性粒细胞白血病 摘要：目的：研究柑橘类黄酮诺必擂停(Nobiletin，NOB)对慢性粒细胞白血病细胞K562的作用，通过整体、细胞以及分子水平的研究，初步探讨了其可能的作用机理。 方法：整体水平建立K562裸鼠体内异种移植瘤模型，分别给予不同剂量的NOB治疗，测定各给药组对移植瘤的抑制增殖作用，HE染色观察各组裸鼠肿瘤组织的病理变化，免疫组化染色技术观察肿瘤组织中VEGF的表达及微血管密度；细胞水平MTT法检测NOB对K562细胞的体外抑制作用，AO/EB荧光染色观察NOB诱导K562细胞凋亡，Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫蛋白印迹(Western blotting)及RT-PCR分别检测NOB对K562细胞VEGF蛋白及VEGFmRNA表达的影响。 结果： (1)与对照???比较，NOB在体内及体外均能显著抑制K562细胞的增殖。 (2)裸鼠模型组肿瘤组织新生血管丰富，肿瘤生长旺盛，细胞结构完整，NOB组及阳性组肿瘤组织有明显的出血坏死区，并伴有粒细胞浸润，坏死的细胞核溶解，细胞出现融合。 (3)免疫组化显示：模型组VEGF及CD34高表达，与模型