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梵净山3种茶叶茶多糖含量比较研究 　　摘 要：采用乙醇提取法分别对梵净山绿茶、石阡苔茶和梵净山翠峰中的茶多糖进行提取，用蒽酮-硫酸比色法测定茶多糖的含量。结果表明：3种茶叶的多糖含量依次为：梵净山绿茶为4.99%，石阡苔茶为5.40%，梵净山翠峰为9.03%。由此可知，茶多糖的含量与其品种及产地有密切关系。 关键词：茶多糖；含量；比较分析；蒽酮-硫酸法 中图分类号 S571.1 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2013）20-23-02 茶叶作为世界三大传统饮料之一，因具有多种营养、保健功能而倍受消费者欢迎[1]。茶叶中含有多种药理成分，如生物碱、蛋白质、芳香物质、果胶质、糖类和多酚类等化合物。茶多糖（Tea Polysaccharide，TPS）是一种类似灵芝多糖和人参多糖的高分子化合物，具有很多功能，是重要的生理活性物质。其杰出功效是降血糖、降血脂，从而达到防治糖尿病的作用，除此之外，还具有抗凝血、降血栓、防辐射等作用[2-7]。目前，国内外学者对茶多糖的提取、分离、纯化工艺进行了较为深入的研究[8]，而对梵净山茶叶中的茶多糖研究则未见报道。因此，笔者对梵净山3种茶叶的茶多糖含量进行分析，以期对开展茶叶的综合利用提供参考，为进一步开发利用本地茶叶及后续研究提供参考依据。 1 材料与方法 1.1 材料 梵净山绿茶、石阡苔茶、梵净山翠峰，专卖店购买，预处理保存备用。 1.2 试剂 95%乙醇，天津市富宇精细化工有限公司；无水乙醇，天津市富宇精细化工有限公司；氢氧化钠固体，天津市大茂化学试剂厂；蒽酮，国药集团化学试剂有限公司；葡萄糖，天津市恒兴化学试剂制造有限公司；盐酸，遵义师范学院化学试剂厂；浓硫酸，遵义师范学院化工试剂厂。以上试剂均为国产分析纯。水为二重蒸馏水。 1.3 仪器 101-3型电热鼓风干燥箱，北京科伟永兴仪器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）型循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限责任公司；T6新世纪型紫外分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司；MM823EC8-PS（X）型美的微波炉，佛山市顺德区美的微波电器制造有限公司；80-2型离心沉淀机，江苏金坛市中大仪器厂；AR124CN型电子天平，奥豪斯仪器上海有限公司。 1.4 实验方法[9-12] 1.4.1 材料预处理 用乙酸乙酯浸泡茶叶3.5h后，再用无水乙醇清洗2次，烘干至恒重。乙酸乙酯（mL）：茶叶（g）=6：1。 1.4.2 葡萄糖标准曲线制作[13] 准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容至1 000mL后，分别吸0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2配制成浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12mg/mL，各取2mL于试管中，再加入4mL的蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几支试管均匀加完后一起浸入沸水浴中，准确保温10min后取出冷却，以空白管作对照，在波长620nm处测定吸光度。 1.4.3 配制蒽酮-硫酸试液 精密称取0.165g蒽酮，加50mL浓硫酸，置于棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中（现配现用）。 1.5 测定样品中茶多糖含量[14] 1.5.1 茶多糖的提取 预处理后的茶叶→粉碎→过60目筛→加入浸提剂→微波辅助提取→离心取上清液→Sevage法脱蛋白→离心→活性炭脱色→浓缩→加乙醇沉淀24h→离心取沉淀→乙醇洗涤→定容显色→测吸光值→计算多糖提取率。 1.5.2 茶多糖的含量测定 精密吸取所得样品溶液1mL于具塞试管中，按绘制标准曲线的方法测定吸光度（A），由回归方程计算出样品中茶多糖的含量。 2 结果与分析 2.1 葡萄糖标准曲线 以吸光度（A）为纵坐标，葡萄糖浓度（C）为横坐标，得标准曲线（图1）。 由此可以得出多糖提取率的计算公式：提取率（%）=[（A-0.004）?8.178×V?M?1 000]×100。式中：A为吸光度；M为称取茶的质量（g）；V为浸提液体积（mL）。 2.2 3种茶叶中茶多糖的含量 梵净山中的茶叶多糖含量在4.99%～9.03%，3种茶叶中梵净山翠峰茶多糖含量最高（9.03%），其次是石阡苔茶（5.40%），再次是梵净山绿茶（4.99%），由于它们的生境不同，因此茶多糖含量有一定差异。 3 结果与讨论 采用乙醇提取法对梵净山3种茶叶茶多糖在微波作用下进行提取，蒽酮-硫酸比色法进行比色，通过葡萄糖标准曲线计算茶多糖含量，此法操作简便。研究结果表明：茶多糖含量最高为梵净山翠峰（9.03%），其次为石阡苔茶（5.40%），再次为梵净山绿茶（4.99%）。 茶叶中茶多糖的含量与许多因素有关，一般认为，不同种类和产地茶叶中的茶多糖含量有所不同。余正