果蝇幼虫唾液腺细胞巨大染色体的制作.pdfVIP

文化素质教育课程 “ 生命科学导论” 实验 果蝇幼虫唾液腺细胞巨大 果蝇幼虫唾液腺细胞巨大 染色体的制作 染色体的制作 模式动物果蝇的识别及幼虫唾液腺细 胞巨大染色体的制作 黑腹果蝇(D rosophila melanogaster) 何为果蝇巨大染色体? 何为果蝇巨大染色体? 果蝇唾液腺巨大染色体 同样放大倍数下黑腹果蝇的多线性的第Ⅳ染色 体(下)与有丝分裂中期的第Ⅳ染色体(右上图箭号所指的 点状染色体)的比较。(据Bridges, 1935, ) 箭头代表蓬松区和缢缩区; 实心圆代表深条纹,空心圆代表浅条纹 一、实验目的： 学会识别果蝇外观形态特征尤其是雌雄性别的基本 特征,掌握果蝇唾液腺的分离及巨大染色体波片的制 作技术。 二、实验原理： 采用常规压片染色法，是将昆虫幼虫，常用果蝇和 蚊子幼虫的唾液腺为材料压碎在载玻片上的一种非 切片法。此法为细胞学，遗传学研究理想的方法， 可以同时观察有丝分裂过程中染色体的形态和数量。 。 三、实验材料： 三、实验材料： 器材：解剖针一对，载玻片，盖玻片，吸水纸。 试剂：Ringer’s生理溶液，醋酸洋红染色液。 材料：果蝇三龄幼虫。 四、实验步骤: 四、实验步骤: 取洁净的载玻片一片，加滴几滴Ringer’s生理溶液 于载玻片上面，把幼虫放在载玻片左方，把载玻片 放在双筒解剖镜下。左手持一解剖针固定虫体尾 端，右手手持另一解剖针插入口中部，向右稳拉， 拉出液浸入Ringer’s生理溶液，唾液腺为两条白色 透明香肠状物，连在食道两侧，用解剖针将唾液腺 以外的组织去掉，并分离附在唾液腺上的脂肪。 另取一洁净玻片，滴上醋酸洋红一滴，将解剖的唾 液腺用解剖针移到染液中，浸染5分钟。 将盖玻片轻放在染液上，上覆盖吸水纸用右手指 将盖玻片轻放在染液上，上覆盖吸水纸用右手指 在纸上往返擦拭以吸掉过剩的染色液，如下图用 在纸上往返擦拭以吸掉过剩的染色液，如下图用 镊子前端斜压住盖玻片向前推压, 有利于染色体展 镊子前端斜压住盖玻片向前推压, 有利于染色体展 开,然后再换上一张干净的吸水纸，再用手指用较 开,然后再换上一张干净的吸水纸，再用手指用较 大的压力把腺体压碎，到盖玻片下呈很浅的粉红 大的压力把腺体压碎，到盖玻片下呈很浅的粉红 色为止。这时，如制片较好，可在镜下看到染色 色为止。这时，如制片较好，可在镜下看到染色 体散得很开，并有清晰的条纹（在制片过程中要 体散得很开，并有清晰的条纹（在制片过程中要 注意保持腺体不干） 注意保持腺体不干） 以溶化石蜡将盖玻片封起来，可保存数星期。 以溶化石蜡将盖玻片封起来，可保存数星期。 五、作业 五、作业 每人交一片制备好的染色体玻片。