结肠腺癌中结肠癌干细胞的分离鉴定-海洋环境科学.pdfVIP

第３３卷 第１期 世界科技研究与发展 Ｖｏｌ．３３ Ｎｏ．１ 　 　 ２０１１年２月 １４１－１４７页 ＷＯＲＬＤＳＣＩＴＥＣＨＲ＆Ｄ Ｆｅｂ．２０１１ ｐｐ．１４１－１４７ 结肠腺癌中结肠癌干细胞的分离、鉴定 艾　亮　刘　美　陈　宓　李少林 （重庆医科大学放射医学教研室，重庆４０００１６） 摘　要：目的从人结肠腺癌组织中分离、鉴定结肠癌干细胞，并初步观察其生物学特性。方法 利用新鲜结肠腺癌组织，无血清悬 浮成球培养，流式细胞检测ＥＳＡ、ＣＤ４４表达情况，体外观察其诱导分化及ＣＫ２０、Ｍｕｃ表达情况，Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠移植观察其成瘤情况。 ｈｉｇｈ ＋ ｈｉｇｈ ＋ 结果从人原代结肠腺癌中分离、纯化ＥｐＣＡＭ ＣＤ４４ 结肠癌干细胞，结肠癌原代细胞中ＥｐＣＡＭ ＣＤ４４ 细胞比例为１７％～ ３８％（平均５．４％）。单克隆形成实验证实结肠癌组织中存在肿瘤干细胞，其比例为（２０７±０１１）％，分离获得的ＥｐＣＡＭｈｉｇｈ ＋ ｈｉｇｈ ＋ ＣＤ４４ 细胞能在无血清培养基中“成球”，在血清诱导下能贴壁分化；将ＥｐＣＡＭ ＣＤ４４ 细胞移植在 Ｂａｌｂ／Ｃ裸鼠体内，表现出很 ｈｉｇｈ ＋ 强的致瘤性，移植瘤中ＥｐＣＡＭ ＣＤ４４ 细胞比例为３６％～４３２％（平均１５２％），所有的移植瘤经组织学测定，均形成腺管样结 构，表达结肠特异性分化标志物ＣＫ２０、中性上皮粘蛋白（ｎｅｕｔｒａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｍｕｃｉｎｓ，Ｍｕｃ）。结论 人结肠腺癌组织中存在 ＥｐＣＡＭｈｉｇｈ ＋ ＣＤ４４ 细胞群，具有和普通干细胞相类似的无限增殖、自我更新和分化能力。 ｈｉｇｈ ＋ 关键词：结肠腺癌；结肠癌干细胞；ＥｐＣＡＭ ＣＤ４４ ；分离及鉴定 中图分类号：Ｒ７３５．３５　　　文献标识码：Ａ　　　 ｈｉｇｈ ＋ ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＥｐＣＡＭ ＣＤ４４ ＣｏｌｏｎＣａｎｃｅｒＳｔｅｍＣｅｌｌｓ  ｆｒｏｍＣｏｌｏｎＡｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ＡＩＬｉａｎｇ　ＬＩＵＭｅｉ　ＣＨＥＮＭｉ　ＬＩＳｈａｏｌｉｎ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＲａｄｉｏｌｏｇｙ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｓｏｌａｔｅｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｆｒｅｓｈｃｏｌｏｎａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｏｂｔａｉｎｅｄａｔｓｕｒｇｉｃａｌｏｐｅｒａｔｉｏｎａｎｄｔｏｓｔｕｄｙ ｔｈｅｉｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓｃｏ