鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸的合成工艺研究.docxVIP

ｄｏｉ１０．３９６９ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－５４２５．２０１４．０１．０１３鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸的合成工艺研究张飞，赵静国，赵蒙浩（武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北武汉４３００２３）摘要：以猪去氧胆酸为原料，合成了鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸。为优化中间体与目标产物的合成工艺，探索了反应条件及重结晶条件等。鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的总产率分别达到２６％、１９％，ＨＰＬＣ检测其纯度相应为９７．５％、 ９６．２％。通过熔点、ＭＳ和１ＨＮＭＲ测定确证了各关键中间体及目标产物结构。改进后的工艺原料易得、总产率较高、后 处理操作简便，具有较高的应用价值。关键词：猪去氧胆酸；鹅去氧胆酸；熊去氧胆酸；合成工艺中图分类号：ＴＱ４６４．５文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－５４２５（２０１４）０１－００４７－０４鹅去氧胆酸（ｃｈｅｎｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ，ＣＤＣＡ）是动物体胆汁中的一种生化物质，临床上不仅用作溶解胆固醇类结石和纠正饱和胆汁的药物，还具有显著的平喘、抗炎、镇咳和祛痰作用，同时鹅去氧胆酸还是昂贵的熊去氧胆酸（ｕｒｓｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ，ＵＤＣＡ）的合成原料［１］。熊去氧胆酸是名贵中药熊胆中的主要有效成分，在临床上用于治疗各种胆石疾病及急慢性肝病，具有良好的效果［２］。目前，制备鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸主要有动物胆汁提取和人工合成两种方法，但动物胆汁提取来源有限，难以满足医疗需要。现有合成鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸的路线多以牛羊胆酸为起始原料，但该原料价格昂贵。作者参照文献［３－４］以廉价易得的猪去氧胆酸（ｈｙｏｄｅｓｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ，ＨＤＣＡ）为原料合成鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸，优化了合成工艺条件。其合成路线如图１所示。１实验１．１试剂与仪器猪去氧胆酸（纯度≥９８％），自制，经熔点、１ＨＮＭＲ和 ＭＳ确认；乙腈（色谱纯）；重蒸馏水；其余试剂均为国产分析纯。ＹＲＴ－３型熔点仪，天津大学精密仪器厂；ＭｅｒｃｕｒｙＰｌｕｓ－４００型核磁共振氢谱仪，美国Ｖａｒｉａｎ公司；ＴｒａｃｅＭＳ２０００型气相色谱质谱联用仪，美国Ｆｉｎｎｉｇａｎ公司；戴安Ｐ６８０型高效液相色谱仪；戴安ＵＶＤ１７０Ｕ型检测器；ＧｒａｃｅＤａｖｉｓｏｎＤｉｓｃｏｖｅｒｙＳｃｉｅｎｃｅｓＣ１８色谱柱（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ）。１．２方法１．２．１３α，６α－二对甲苯磺酰氧基－５β－胆烷酸甲酯（Ⅱ） 的制备取２０ｇ猪去氧胆酸（Ⅰ）溶于１２０ｍＬ甲醇中，加 入１２ｍＬ浓盐酸，搅拌回流３ｈ，经ＴＬＣ检测反应完毕；自然冷却，加入Ｎａ２ＣＯ３中和至中性，减压浓缩除去大部分甲醇，残留物用乙酸乙酯提取，滤除无机盐， 滤液用饱和ＮａＨＣＯ３洗涤１次、水洗２次，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得白色固体即猪去氧胆酸甲酯２０ｇ，粗产率为９８％。取１６ｇ猪去氧胆酸甲酯溶于４８ｍＬ吡啶中，冰水浴搅拌溶解，然后分批加入２０ｇ对甲苯磺酰氯（经石油醚重结晶），冰水浴反应２ｈ，室温搅拌２４ｈ，经ＴＬＣ检测反应完毕；将反应液倒入加有碎冰的５％盐酸溶液中，待固体析出后，抽滤，水洗，干燥，得白色固体粉末，再用乙酸乙酯重结晶，干燥，得白色固体即化合物Ⅱ２６ｇ，产率为９３％。１．２．２Δ５－３β－羟基胆烷酸甲酯（Ⅲ）的制备将２８．８ｇ醋酸钾、１６０ｍＬＤＭＦ和２４ｍＬ水混合，升温至１１０℃后，保温１５ｍｉｎ，加入２４ｇ化合物Ⅱ，回流搅拌４ｈ，经ＴＬＣ检测反应完毕；冷却至室温， 有白色固体析出，倒入１２００ｍＬ加有碎冰的５％盐酸收稿日期：２０１３－０９－１０作者简介：张飞（１９８８－），男，湖北松滋人，硕士研究生，研究方向：药物化学，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｆ０７０７２１０３６＠１６３．ｃｏｍ；通讯作者：赵静国，副 教授。ａ．３７．５％ＨＣｌ，ＭｅＯＨｂ．ｐ－ＴｓＣｌ，Ｐｙｃ．ＫＡｃ，ＤＭＦ，Ｈ２Ｏｄ．异丙醇铝，环己酮ｅ．四氯苯醌，ＥｔＯＡｃｆ．ｍ－ＣＰＢＡ，ＣＨ２Ｃｌ２ｇ．１０％Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨｈ．ＫＢＨ４，ＭｅＯＨｉ．ＮａＯＨ，ＭｅＯＨｊ．ＮＢＳ，Ａｃｅｔｏｎｅ－Ｈ２Ｏｋ．ＫＢＨ４，ＣｅＣｌ３·７Ｈ２Ｏ，ＴＨＦ－ＭｅＯＨ图１鹅去氧胆酸与熊去氧胆酸的合成路线Ｆｉｇ．１ＴｈｅｓｙｎｔｈｅｔｉｃｒｏｕｔｅｓｏｆＣＤＣＡａｎｄＵＤＣＡ溶液中，剧烈搅拌，过滤，水洗滤液至中性，干燥，得白色固体。向该白色固体中加入２１０ｍＬ２％的ＫＯＨ甲 醇溶液，室温搅拌２ｈ，经ＴＬＣ检测反应完毕；用５％的盐酸中和至中性，减压浓缩除去大部分甲醇，加入冰水，待固体析出后，抽滤，水洗，重结晶（乙酸乙酯－石油醚），干燥，得白色固体即化合物Ⅲ１０．８ｇ，产率为８３％。１．２．４Δ４，６－３－酮胆烷酸甲酯（Ⅴ）的制备取８ｇ化合物Ⅳ溶于２５０ｍＬ乙酸乙酯中，加入８ｇ四氯苯醌和１ｍＬ对甲苯磺酸，回流搅拌反应３ｈ， 经ＴＬＣ检测反应完毕；自然冷却，