两株黄河三角洲耐盐真菌次生代谢产物的研究Study on secondary metabolites of two strains of salt tolerant fungi in the Yellow River Delta.pdf

万方数据 谨以此论文献给我敬爱的导师朱伟明教授和 所有给予我无私帮助的家人及朋友 ——— 廖庆云 万方数据 万方数据 万方数据 两株黄河三角洲耐盐真菌次生代谢产物的研究 两株黄河三角洲耐盐真菌次生代谢产物的研究 摘 要 耐盐微生物生活和培养的环境比较特殊 而普通微生物很难生存 在这种环 境中可能具有特殊的生物代谢途径 从而可以产生独特的代谢产物。山东东营黄 河三角洲自然保护土壤严重盐渍化 许多地方土壤含高盐度 同时受到海陆的共 同作用 形成了比较独特的生态环境。这一区域存在着能产生结构新颖活性化合 物的耐盐微生物 值得深入研究。 为了研究黄河三角洲来源耐盐菌株次生代谢产物 我们结合化学和活性集成 筛选模式 对黄河三角洲盐碱地土壤中微生物进行了研究。主要内容为：耐盐微 生物的分离纯化；耐盐真菌的筛选和和发酵条件优化；耐盐真菌次生代谢产物的 分离纯化；单体化合物结构鉴定和活性初步评价。 从黄河三角洲泥土样品、西沙群岛海域海绵和珊瑚样品以及南海深海海水和 海泥样品中分离纯化排重后得到耐盐菌株192株，包括 121株真菌 56株放线 15 菌和 株细菌。并通过化学和活性相结合的筛选方法，筛选到两株耐盐真菌 OUCMDZ-2713 和 OUCMDZ-2702 ，菌株鉴定分别为支孢样支孢霉菌 (Cladosporiumcladosporioides)和支顶孢属(Acremonium sp.)真菌 并对其次生代 谢产物进行进一步探索研究。 通过考察不同培养方式、培养基、酸碱度和盐度四个方面对这两株耐盐真菌 次生代谢产物的影响 确定大发酵条件。对其次生代谢产物采用减压和加压硅胶 柱色谱、薄层色谱、凝胶柱色谱和半制备高效液相色谱等多种色谱分离技术进行 分离纯化，从两株真菌的发酵产物中共分离到22个单体化合物，结合质谱和核 磁共振波谱等波谱学手段鉴定化合物结构 最终鉴定17个化合物结构(1-17) （结 构见图 1）。结构类型分别为2个内酰胺类（1、2） 7个二酮哌嗪类（3-9） 3 13-15 2 10 11 1 12 1 个脂肪酸酯类 （ ） 个核苷类 （ 、 ） 个邻二醇类 （ ） 个吡咯甲 16 17 1 2 酰胺 （ ）以及一个甾醇化合物 （ ）其中内酰胺类化合物 、 以及脂肪酸酯 类化合物13为新化合物。 采用纸片法对部分化合物进行了抑菌活性初步评价 基本无抑菌作用。采用 MTT CCK-8 MCF-7 A549 K562 法和 法对部分化合物的 、 和 细胞毒活性进行初 步评价，均没有抑制作用。推测其活性部分化合物还未获得。 综上 本文结合化学与活性集成筛选模式得到两株耐盐真菌 并对这两株耐 盐真菌次生代谢产物进行了深入研究，共分离鉴定了17个单体化合物，获得3 个新化合物 并对这些化合物的抑菌和细胞毒活性进行了初步评价。这些结果表 明耐盐真菌有很大到研究潜力，值得深入系统的进一步探索。 万方数据 两株黄河三角洲耐盐真菌次生代谢产物的研究 关键词：耐盐微生物，耐盐真菌，黄河三角洲，次生代谢产物，活性 万方数据 两株黄河三角洲耐盐