刺参酸性粘多糖对H22荷瘤小鼠肿瘤生长抑制作用及相关基因与蛋白表达的影响Effect of acid mucopolysaccharide on growth inhibition and related genes and protein expression in H22 tumor bearing mice.pdfVIP

摘 要 acidic 目的：通过观察刺参酸性粘多糖(Stichopusjaponicas 对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用，从细胞分子生物学角度探讨其对H22肝 癌细胞的增殖与凋亡作用，研究H22肝癌细胞增殖凋亡相关基因及蛋白的表达， 为SJAMP的进一步开发利用提供科学依据。 方法：建立肝癌H22荷瘤小鼠模型，将50只昆明种小鼠随机分为5组，每组10只， 雌雄各半，分别为阴性对照组(A组，生理盐水)、阳性对照组(B组，5-FU 20mg／kg)、SJAMP低剂量组(C组，SJAMP 组，SJAMP 12．5mg／kg)、SJAMP高剂量组(E组，SJAMP25mg／kg)。在建立肝 癌模型的同时，各组均采用腹腔注射方式给药，每日一次，连续给药12天后处 死。观察小鼠肿瘤发生情况，分别应用光学显微镜及电镜观察各实验组小鼠的 瘤组织及细胞的病理学变化，用免疫组织化学方法检测H22肿瘤细胞内PCNA、 P53、P21、C．myc、Cyclin mRNA的表达。 D1、CDK4、pRb、E2F．1、Bcl一2、Bax C—myc、Cyclin 结果：荷瘤小鼠经腹腔注射12天后，脱颈椎处死，无菌条件下剥取肿瘤组织，发现实 验各组均有肿瘤组织出现，同阴性对照组相比，其它四组瘤量均有所减轻，且B、 剂量组肿瘤细胞排列疏松，细胞质固缩，核质比减小；透射电镜观察发现，SJAMP 各剂量组肿瘤细胞均出现不同程度的凋亡形态学特征，如出现细胞固缩、细胞 质边集、凋亡小体等；免疫组织化学检测结果显示，与A组相比，SJAMP各剂 D1、CDK4、 量组小鼠与细胞增殖凋亡相关蛋白PCNA、P53、C．myc、Cyclin PCR结果显示，与 白的表达上升，且差别有统计学意义(尸O．05)；Real—time pRb、Bax蛋白的表达上升，且差别有统计学意义(PO．05)。 mRNA及蛋白的 胞内增殖细胞核蛋白PCNA、增殖相关基因p53、p21、C．myc mRNA及蛋 表达，并通过调节Rb．E2F通路中CyclinD1、CDK4、pRb、E2F-1 白的表达，作用于细胞周期，使小鼠H22肝癌细胞发生细胞周期阻滞，抑制肿 瘤细胞增殖；SJAMP也可能能通过调节肿瘤细胞内凋亡相关基因Bax、Bcl．2 mRNA及蛋白的表达，促进肿瘤细胞发生凋亡，从而达到抑制H22荷瘤小鼠肿 瘤生长的作用。 硕士研究生陈丹丹营养与食品卫生学 指导教师 宋扬教授 关键词：刺参酸性粘多糖；肝肿瘤；细胞增殖；细胞凋亡；荷瘤小鼠 Abstract observetheeffectof acidic Objective：To Stichopusjaponicas mucopolysaccharide mice ofH22 the (SJAMP)in