芝麻子叶基因转化受体系统的建立芝麻子叶基因转化受体系统的建立.pdfVIP

分子植物育种，2011年，第9卷，第6期，第 770—778页 MolecularPlantBreeding，2011，Vo1．9，No．6，770—778 研究报告 A Letter 芝麻子叶基因转化受体系统的建立 魏利斌 马琴 琚铭 张体德 王慧丽 苗红梅 河南省农业科学院芝麻研究中心，郑州，450002 通讯作者，miaohongmei@yahoo．com．cn 摘 要 试验以芝麻栽培种豫芝 l1号为材料，对子叶丛生芽诱导及植株再生体系以及子叶受体材料对卡那 霉素、潮霉素和头孢霉素的天然耐性进行了研究，建立了芝麻子叶基因高频转化受体系统。结果表明，适宜 的诱芽培养基为MS+5．0mg／L6一BA+1．0mg／LIAA+5．0mg／LAgNO3+1．0mg／LABA+3％蔗糖+0．8％琼脂； 6一BA对子叶膨大起决定作用，ABA、IAA则是诱导丛生芽高频发生的关键因子，AgNO对丛生芽发生有显 著的促进作用。在芝麻子叶膨大出芽期、芽增殖期及试管苗生根期等遗传转化的三个重要时期，适宜的卡那 霉素筛选浓度分别为70mg／L、70mg／L、20mgL／，潮霉素筛选浓度分别为40mg／L、60mg／L、10mg／L。在农 杆菌介导的芝麻遗传转化中，头孢霉素使用浓度 以500mg／L为宜，抑菌效果好且不影响转化受体生长。 关键词 芝麻，子叶，受体系统 EstabfishmentofanAcceptorSystem forGeneTransformationinSesame s indicumL．)Cotyledon WeiLibin MaQin JuMing ZhangTide WangHuiliMiaoHongmei’ Henann羽 s|嘴蛐 Re,earthC即溉 H蚺 哺 AcademyofkgriealturatSciences，Zhengzhou，450002 ‘~ ia~aulhar,miaok DO／：10．3969hnpb．009．000770 Abstract Toestablishtheacceptor m forgenetransformationinsesamecotyledon，perfectculturemedium forbud inducementfrom sesamecotyledon andplantletregeneration hasbeen investigated，aswellasthe nedurancepointsofexplantsandplantlets0nselectiveagents，i．e．，Kanamycin，HygromycinandCeoftaxime，have been studiedde印ly．Resultsshowedthatsuitabledifferentiationmedium wasM Scontaining5．0mg／L 6-BA， 1．0merlEIA 5．0mg／LAgNO 1．0mg／LABA,3％sucroseand0．8％agar．6-BAwoulddeterminethecotyledon expansion．Moreover,benigthekeyfactorsofrshootregeneration,ABA and couldinducehighfrequencyof adventitiousbudformation,andAgN03couldaccelerateremarkablemultipleshootsregeneration．Duringthree importantstagesofcotyledon expansionandbudformation, adventitiousbudproliferation，andplantletroot formationinthegeneticmodificationsystem ofrSesamum indicumL，appropriateconcentrationofKanamycinare 70mg／L，70mg／L and20mg／L，Hygromycinare40mg／L，60mg／L，10mg／L，respectively．In thegenetic modificationsystembyA．tumefaciensinfection，500mg／LCefotaximecouldbechosen，bywhichA．tumefaciens srtaingrowthcouldbeinhibitedwhenneeded，yetsesameexplantsandshoot