活性氧介导的铁过载对小鼠骨髓间充质干细胞的影响及其机制探讨.pdfVIP

Med J Chin PLA, Vol. 40, No. 2, February 1, 2015 　97 论　著 ·基础研究· 活性氧介导的铁过载对小鼠骨髓间充质干细胞的影响及其 机制探讨 沈继春，张宇辰，赵明峰 [摘要]　目的　建立小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)铁过载(IO)模型，并对铁过载模型小鼠进行去铁及抗氧化 治疗，探讨铁过载对小鼠BM-MSCs 的损伤作用及活性氧(ROS)在该损伤中的作用机制。方法　采用随机区组设计，将 40 只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、铁剂(右旋糖酐铁，25mg/ml)组(IO组) 、铁剂＋去铁治疗(DFX ，125mg/kg)组 (Fe+DFX组) 、铁剂＋抗氧化治疗(NAC ，40mmol/L)组(Fe+NAC组) ，每组10只。从小鼠密质骨中分离BM-MSCs培养至 P1代，检测BM-MSCs 内铁颗粒、不稳定铁(LIP)及ROS水平；利用倍增时间及CCK-8试剂盒检测BM-MSCs增殖情况； 采用碱性磷酸酶染色(ALP) 、茜素红染色、成骨分化基因检测等方法评估BM-MSCs成骨分化能力；采用油红O染色检 测BM-MSCs成脂定向分化能力。结果　与对照组相比，铁剂组BM-MSCs 内存在明显铁颗粒，LIP及ROS水平明显增高 (P 0.05) ，倍增时间明显延长(2.07 ±0.14d vs P 1.03 ±0.07d ， 0.01) 。DFX组及NAC组倍增时间较铁剂组有所缩短，分别 为1.52 ±0.07d与1.68 ±0.03d(P 0.05) 。与对照组比较，铁剂组BM-MSCs矿化能力及向成骨细胞分化能力下降，成骨基 因ALP 、RUNX2 、OSN表达增强，而成脂定向分化能力增强。在去铁及抗氧化治疗后，上述改变发生部分逆转。结论 　铁过载可影响小鼠骨髓MSCs 的增殖及定向分化能力，其机制可能与铁过载所致ROS升高有关。 [关键词]　铁超负荷；间质干细胞；活性氧 [中图分类号]　R551.3　　　　[文献标志码]　A　　　　[文章编号]　0577-7402(2015)02-0097-07 [DOI]　10.11855/j.issn.0577-7402.2015.02.03 Effect of reactive oxygen species mediated iron overload on murine bone marrow mesenchymal stem cells and its mechanism SHEN Ji-chun1 2 2* , ZHANG Yu-chen , ZHAO Ming-feng 1Department of Hematology, Affiliated Hospital of Logistics University of People’s A rmed Police Forces, Tianjin 300162, China 2Department of Hematology, The First Central Clinical College of Tianjin Medical University, Tianjin 300192, China * Corresponding author, E-mail: zmfzmf@ This work was supported by the Natural Science Foundation of China , Natural Science Foundation of Tianjin (13JCYBJC23400), and Science and Technology Foundation of Tianjin Health Bureau(2013KR07)