皮质酮浓度对sd大鼠成骨细胞成骨基因表达的影响-海南医学.pdfVIP

doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2015.18.0969 ·论 著· 皮质酮浓度对SD大鼠成骨细胞成骨基因表达的影响 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 康银辉 ，魏 波 ，祝兆波 ，郭伟雄 ，王朝军 ，宋丽君 ，林 颢 ，李广盛 ，楚佳奇 ，曾 荣 1 2 (广东医学院附属医院骨科中心 、生殖中心 ，广东 湛江 524001) 【摘要】 目的 探讨皮质酮对离体SD 大鼠成骨细胞功能的影响。方法 采用多次胶原酶组织消化法获得 新生SD 大鼠颅骨中的成骨细胞作为研究对象，用倒置显微镜及碱性磷酸酶、钙结节染色观察成骨细胞形态， CCK-8 法检测皮质酮对成骨细胞增殖的影响，根据CCK-8 结果将SD 大鼠成骨细胞分成四组，分别用含不同浓 度的皮质酮(0 µmol/L、0.1 µmol/L、1.0 µmol/L、10.0 µmol/L)的DMEM(H)培养基培养，作用24 h 后，测定成骨细胞 内碱性磷酸酶含量，采用RT-PCR 检测成骨细胞内COL1A、OCN、ALP 基因表达，采用Western blot 检测成骨细胞 内COL1A、OCN、RUNX-2 蛋白的表达。结果 CCK-8 结果显示皮质酮能抑制成骨细胞的增殖，皮质酮能抑制 成骨细胞内碱性磷酸酶的生成，与浓度明显相关；RT-PCR 与Western blot 检测可见COL1A、OCN、ALP 基因表达 及COL1A、OCN、RUNX-2 蛋白的表达下降。结论 皮质酮在超生理剂量的浓度下能抑制成骨细胞增殖及细胞 内碱性磷酸酶的合成，减少COL1A、OCN、ALP 基因及COL1A、OCN、RUNX-2 蛋白的表达。 【关键词】 皮质酮；成骨细胞；基因表达；成骨 【中图分类号】R-332 【文献标识码】A 【文章编号】 1003—6350（2015 ）18—2661—04 EffectofcorticosteroneconcentrationonosteoblasticgeneexpressionofSDratosteoblasts.KANG Yin-hui 1, WEI 1 1 1 1 2 1 1 1 Bo , ZHU Zhao-bo , GUO Wei-xiong , WANG Chao-jun , SONG Li-jun , LIN Hao , LI Guang-sheng , CHU Jia-qi , ZENG Rong 1. Orthopedic Centre 1, Lab of Reproductive Medicine 2, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, Guangdong, CHINA 【Abstract】 Objective To investigate the effect of different corticosterone concentration on the gene expres- sion of SD rat osteoblasts in vitro. Methods Newborn SD rat osteoblasts in