固定化渗透乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces Lactis)连续水解乳清的研究 Continuous Hydrolysis Lactose in Whey by Immobilized Permeable Kluyveromyces lactis.pdfVIP

Lactis) 固定化渗透乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces 连续水解乳清的研究+ 王春阳，迟玉杰 (东北农业大学食品学院，黑龙江哈尔滨，150030) 摘 要 研究了一种利用固定化渗透乳酸克鲁维酵母催化水解乳清中乳糖的技术，分析了制备工艺、水解条件 对于固定化细胞活性的影响。结果表明，在细胞添加量为60％、交联剂为1％BaCI：，凝胶颗粒大小为1～1．5 miD．时，固定化细胞的活性可达到78．819 U／g，固定化细胞最适反应温度为36℃，最适pH值7．0，相对于游离 细胞，固定化细胞在对温度及pH的适应性上均有所提高，具有较好的应用前景。此外初步探索了一种复合流 速连续水解的工艺，即在水解不同阶段，采用了不同的流速进行水解。结果表明，这种复合流速连续水解工艺可 以在一定程度上缩短水解时间，提高水解的效率。 关键词 固定化，渗透乳酸克鲁维酵母，连续水解，乳清 乳清是工业生产干酪和干酪素过程中主要的副 与酶的提取等过程。在固定化方法的选择上，采用了 产品，约占牛乳营养成分的55％。其主要成分是乳 操作相对简单，固定化细胞效果较好的固定化方 糖。然而这种极具经济价值的原料却由于乳糖自身 法——海藻酸钠包埋法‘7~8]。因此极大地简化了工 的一些缺点，如溶解性差、甜度低、容易引起乳糖不耐 艺，降低了成本。此外根据B一半乳糖苷酶自身的催化 症等，无法得到较好的利用。利用B一半乳糖苷酶将1 特点，初步探索了一种复合流速连续水解工艺。 分子的乳糖分解为1分子葡萄糖和1分子半乳糖，可 1 材料与方法 以很好地解决这些问题。经过处理的乳清可用于配 制婴儿乳粉，生产酸乳，也可作为糖浆添加到糖果、面 1．1材料与设备 包和啤酒生产中E1～3]。 材料：乳酸克鲁维酵母(购自中国工业微生物菌 目前利用B一半乳糖苷酶分解乳糖主要有2种方 种保藏中心)；海藻酸钠(市售食品级)；乳清(由同一 式，游离方式与固定化方式。利用游离乳糖酶分解乳 批美国环球公司生产的乳清粉加蒸馏水配制而成，经 糖虽然操作简单，但存在着混入外源蛋白、无法连续 测定其基本成分如下：乳糖含量68．4％、脂肪1．2％、 操作、生产成本高等缺点。固定化乳糖酶技术则在一 蛋白质7．4％)；葡萄糖试剂盒(中生北控生物科技股 定程度上克服了上述这些缺点，降低了生产成本[4]， 份有限公司)，其他试剂均为分析纯。 因此成为近年来研究的重点。 型可见分光光度计(天津市普瑞斯仪器有限公司)； 乳酸克鲁维酵母生产的p一半乳糖苷酶，因其最适 pH接近中性、与牛乳和乳清的pH值相近、最适温度LD4—2A离心机(北京医用离心机厂) 较低、容易培养等优点，成为商业上生产B一半乳糖苷 1．2实验方法 乳酸克鲁维酵母的培养与渗透化处理：种子培养 酶的主要菌种口]，但其生产的p一半乳糖苷酶属于胞内 (质量浓度)，2％乳糖、2％蛋白胨、1％酵母膏，30℃培 酶，在进行酶的固定化时，需要先对细胞进行破碎，经 养20h；发酵培养，8％乳糖、0．5％葡萄糖、0．7％酵 分离纯化才能进行固定化操作n]。然而酶的提取工 艺复杂，且提取过程中会有大量酶失活，造成固定化 0．01 oAMnCIz，30℃培养18h。培养好的细胞