蛋白质的性质5.ppt

- - - - - - + + + + + + Pr 调pI Pr 有机溶剂 有机溶剂 酸性溶液 + + + + + + Pr Pr Pr Pr Pr - - - - - - + + + + + + Pr Pr - - - + + + + + + Pr - - - - - - 碱性溶液 有机溶剂 - - - Pr - - - - - - Pr Pr Pr 调pI 调pI 聚集 聚集 聚集 Pr Pr Pr 沉淀 沉淀 沉淀 蛋白质的沉淀作用 水溶液 五. 蛋白质的紫外吸收光谱 蛋白质在远紫外光区（200-230nm）有较大的吸收，在280nm有一特征吸收峰，可利用这一特性对蛋白质进行定性定量鉴定。 蛋白质质量浓度/（mg/ml）=1.55A1cm - 0.76A1cm 280 260 测定范围：0.1～0.5mg/ml 第五节　蛋白质的重要性质 200 220 240 260 280 300 波长（nm) 光吸收 稀 较浓 六．蛋白质主要呈色反应 双缩脲反应 酚试剂反应 茚三酮反应 蛋白质定量、定性测定常用方法 第五节　蛋白质的重要性质 双缩脲反应 蛋白质在碱性溶液中能与硫酸铜发生相同反应，产生红紫色络合物。 红紫色络合物 (碱性溶液) Cu2+ 加热 + + 六．蛋白质主要呈色反应 第五节　蛋白质的重要性质 七.最低分子量法测蛋白质分子量 根据化学组成测分子量 用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量。并假设蛋白质分子中含有一个被测元素的原子，则可由此计算出蛋白质的最低分子量。 第五节　蛋白质的重要性质 例1：猪心细胞色素C含铁量0.43％，求其最低分子量。 其它方法测CytcMw也是13000，说明Cytc只含一个Fe。 55.85 Cytc Mw = = 13000 0.43% 解： Mw = 元素的原子量 元素在蛋白质中的百分含量 七.最低分子量法测蛋白质分子量 第五节　蛋白质的重要性质 例2 ：Hb含铁量0.34％，求其最低分子量。 其它方法测得Mw是68000，说明Hb中含4个Fe. 如果蛋白质中存在含量特少的氨基酸，也可以用同样的原理计算蛋白质的最低分子量。 55.85 解： Hb Mw = = 16700 0.34% 七.最低分子量法测蛋白质分子量 第五节　蛋白质的重要性质 第五节　蛋白质的重要性质 一、 蛋白质的胶体性质 二、 两性性质及等电点 三、 蛋白的变性与复性 四、 蛋白质的沉淀 五、 蛋白质的紫外吸收 六、 蛋白质的呈色反应 七、 最低分子量法测蛋白质分子量 习 题 1、为什么说蛋白质水溶液是一种稳定的亲水胶体？ 2、什么是蛋白质的变性？变性的机制是什么？举例说明蛋白质变性在实践中的应用。 3．某纯酶含有1.65% 亮氨酸和2.48% 异亮氨酸（重量百分比），计算它的最低分子量是多少？ 4．有A、B、C 三种蛋白质，在pH7进行电泳，结果如下图。若在pH7用中性盐沉淀这三种蛋白质，哪种首先沉淀，其次是哪一种，最后是哪一种？ 习 题 College of Life Science and Technology, XINJIANG University College of Life Science and Technology, XINJIANG University LOGO LOGO LOGO 生物化学教学课件 新疆大学生命科学与技术学院 第一节 蛋白质通论 第二节 氨基酸的分类特点及理化性质 第三节 蛋白质的分类及化学结构 第四节 蛋白质的结构与功能的关系 第五节 蛋白质的重要性质 第六节 蛋白质的分离纯化 第一章 蛋 白 质 第五节　蛋白质的重要性质 一、 蛋白质的胶体性质 二、 两性性质及等电点 三、 蛋白的变性与复性 四、 蛋白质的沉淀 五、 蛋白质的紫外吸收 六、 蛋白质的呈色反应 七、 最低分子量法测蛋白质分子量 一. 蛋白质胶体性质 蛋白质分子量很大，在水溶液中形成1-100nm的颗粒，具有胶体溶液的特征。胶体溶液具有布朗运动、光散射现象、电泳现象、不能透过半透膜以及具有吸附能力等特性。 提问：蛋白质胶体溶液的稳定的原因是什么？ 第五节　蛋白质的重要性质 可溶性蛋白质分子表面分布着大量极性基团，对水有很高的亲和性，通过水合作用在蛋白质颗粒外形成一层水化层。蛋白质分子表面的可解离基团，在一定的pH条件下，带有相同的净电荷，这些电荷与环境中的反离子形成稳定的双电层。 答案： 1.蛋白质带有同种电荷的双电层的相互排斥 2.水膜 一. 蛋白质胶体性质 第五节　蛋白质的重要性质 - - - -