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MSS快速操作指南
MSS全波长酶标仪操作指南(SkanIt software 2.2)
新建程序
在Session下选择New,出现Create new session对话框。选择Empty protocol,输入Session name(系统会自动生成相同的protocol name),下一步next。
在板型选择界面(plate layout)中选择所用的酶标板。如果选择“Use default”,默认为96孔板。下一步next。
最后点击Finish,完成新建程序。出现程序主界面。
主界面分为三栏。左上栏分为protocol(实验方法),Plate layout(板型),Result(结果分析)和Run log(运行记录,这个没什么用)。左下栏是左上栏中各项目的具体步骤。而右边栏是左下栏中各步骤的具体参数或结果。
点击Protocol后,可以在Steps中添加实验方法。具体方法是按鼠标右键。或菜单栏Steps。
常用的几个命令有,Plate In(板进),Plate out(板出),Incubate(孵育),Shake(振荡)、Photometric(比色)和Photometric Scanning(全波长扫描),以及Kinetic loop(动力学循环)。
Plate In和Plate out。如果需要直接打开或关闭酶标板托架,可以直接点击快捷工具栏上的图标执行。
Incubate(孵育)。可以设置孵育时间和温度。注意,孵育时间的选择,有两种设置。另,仪器的当前温度见主程序界面的底部。
Shake(振荡)。可以设置On time振板时间,OFF time停顿时间和总的时间。例如,先振板20s,然后停顿10s,再振20s停10s,2个循环共1min。Speed指振荡的速度,Amplitude指振荡的幅度,这两个参数之间相互限制,如果某一个调的特别大,则另一个参数会自动变小,以防止液体溅出。
Photometric(比色)。可以设测量的波长(单波长),也可以设多波长同时检测。
Photometric Scanning(全波长扫描)。
Kinetic loop(动力学测量)。在Kinetic Loop中,可以设置动力学测量的次数,以及测量的时间间隔。在Photometric中可以设置测量的波长。
点击Plate Out可以设置具体的测量孔。可以选择右下角的Fill Wizard,进入填充向导。
有以下几种孔的类型。Blank(空白),Calibrator(标准品),Control(质控品),Empty(空孔),Unknown(待测样品)。箭头用于填充后当前点的位置。
右边部分是稀释标准品部分。Concentration,就是稀释前浓度;Unit输入单位,如mg或mmol;再勾上Generate series,点击Concentrations按钮,进入Concentration对话框。
如图,初始浓度1.0,每次稀释10倍(每次除10),共5个样品,每个2个重复。当然,除了除法,也可以用+、-、*。还可以输入任意值,选Mulitiple values。
确定后,得到下图。如果鼠标落在定义好的孔上,会显示孔的类型,及标准品浓度。
Unknown的设定类似。设定数量(20个样品)和2个重复样品后得到下图。
Blank最简单,设一下数量即可。得到下图。
下一步,进入结果分析的设置。在Result中可以添加,BlankSubstration(减去空白Blank),参数一般选Average。当然,软件也可以做曲线拟合,基本的统计分析等等。这些参看软件使用说明。或者将数据导出到Excel中处理(见后)。
完成以上工作后,在运行程序前保存所编辑的程序。
程序执行
点击Execute下的Session执行程序。出现运行过程对话框。将要测量的孔变成黄色高亮。
如果做扫描,在Start按钮下,会有一个Curve按钮,点击后可以看到各孔扫描的曲线。
数据导出
Report模式
在Result中增加Report。在参数面板中,将需要保存的参数选中,添加。
切换到Report面板,对导出结果进行浏览。按保存,保存结果至Excel文件。
简单模式(Quick Export)。
选中某一结果,如Photometric1。按右键,点击Quick Export,或菜单Calculations / Quick export。选择Matrix,确定后保存结果至TXT文本文件。
用记事本打开保存的文本文件。数据是按矩阵形式保存的,与plate layout对应。
当然,也可以用Excel打开。一路确定后,得到下图。
比色杯功能
点击主程序工具栏上的快捷方式,进入Quick Read对话框。
在这个面板中,既可以选择单波长测量,也可以选择预设程序多波长测量。测定结果显示在Re
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