高效液相色谱分离法在环境污染分析中的应用2.ppt

高效液相色谱分离法在环境污染分析中的应用 11环工第二组 43、45、47、48、59 高效液相色谱法 高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。 高效液相色谱法的应用 在生物化学和生物工程中的应用 在食品分析中的应用 在生命科学中的应用 在医学检验中的应用 在无机分析中的应用 在精细化工分析中的应用 在环境分析中的应用 1.在生物化学和生物工程中的应用 1.1氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究、 1.2核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究 1.3生物胺的分析研究 2.在食品分析中的应用 2.1食品营养成分分析：蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸（邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等）、有机胺、矿物质等； 2.2食品添加剂分析：甜味剂、防腐剂、着色剂（合成色素如柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝等）、抗氧化剂等； 2.3食品污染物分析：霉菌毒素（黄曲霉毒素、黄杆菌毒素、大肠杆菌毒素等）、微量元素、多环芳烃等。 3.在生命科学中的应用 HPLC技术目前已成为生物化学家和医学家在分子水平上研究生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学等必不可少的工具。其在生化领域的应用主要集中于两个方面： 3.1低分子量物质，如氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类、维生素等的分离和测定。 3.2高分子量物质，如多肽、核糖核酸、蛋白质和酶（各种胰岛素、激素、细胞色素、干扰素等）的纯化、分离和测定。 　 过去对这些生物大分子的分离主要依赖于等速电泳、经典离子交换色谱等技术，但都有一定的局限性，远远不能满足生物化学研究的需要。因为在生化领域中经常要求从复杂的混合物基质，如培养基、发酵液、体液、组织中对感性趣的物质进行有效而又特异的分离，通常要求检测限达ng级或pg级，或pmol，fmol，并要求重复性好、快速、自动检测；制备分离、回收率高且不失活。在这些方面，HPLC具有明显的优势。 4.在医学检验中的应用 体液中代谢物测定；药代动力学研究；临床药物监测： 4.1合成药物：抗生素、抗忧郁药物（冬眠灵、氯丙咪嗪、安定、利眠宁、苯巴比妥等）、黄胺类药等。 4.2天然药物生物碱（吲哚碱、颠茄碱、鸦片碱、强心甙）等。 5.在无机分析中的应用 5.1阳、阴离子的分析等。 6.在精细化工分析中的应用 6.1 醇、醛和酮、醚的分离分析 6.2 酸和酯的分离分析 6.3 表面活性剂的分析 6.4 聚合物的分析研究 7.在环境污染分析中的应用 高效液相色谱法适用于对环境中存在的高沸点有机污染物的分析，如大气、水、土壤和食品中存在的多环芳烃、多氯联苯、有机氯农药、氨基甲酸酯农药、含氮除草剂、笨氧氨基酸除草剂、酚类、胺类、黄曲霉素、亚硝胺等。 7.1多环芳烃类化合物的测定 美国环保局 （EPA） 列出的16 项多环芳烃为:萘、苊、二氢苊、笓、蒽、菲、苯并笓等。目前世界上公认的多环芳烃类物质,特别是苯并笓是强致癌物质, 其广泛存在于大气飘尘、水、土壤、生物等环境中,严重影响身体健康。因此这方面所作的工作也比较多。Mzureen joseph的工作表明UV及荧光检测器都能用于PAHs (多环芳烃)的检测,UV检测只用254nm而不用波长程序,对于EPA610方法规定来说, 灵敏度已足够。但使用波长程序比荧光检测灵敏度及选择性更高,荧光检测器与UV检测器串联会获得最好的灵敏度及选择性。 7.2酚类化合物的测定 EPA列出11项酚类化合物, 均是焦化、染料、造纸、化工等工业废水的主要衍生物,酚类化合物应用较广,生产量大,不易降解,对环境污染较严重。其中苯酚是化工原料, 五氯酚是杀虫剂、灭菌剂等。HPLC 测定酚类化合物, 可以保持酚类化合物组成不变,对各种不同取代基及不同结构的酚类化合物可以同时进行分离和分析,且具有重现性好、灵敏度高、择性好的优点。对于不同取代基的酚类化合物高效液相色谱图参见《水和废水监测分析方法》中540页图4-4-5。间硝基酚的高效液相色谱图中,其浓度采用Waters1525 高效液相色谱仪配以2487高灵敏度双通道紫外检测器进行分析,色谱柱为Symmetry(r)5μm反相C18柱,4.6×250mm,流速为1mL·min-1,进样量为20μL