黑龙江省部分地区ped流行特征及病毒生物学特性分析parts of heilongjiang province ped popular characteristics and virus biology characteristics analysis.pdfVIP

摘要 摘要 猪漉行性腹泻(Porcinediarrhea。PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic dian-hea epidemic virus。PEDV)引起的以腹泻、呕吐和脱水为主要临床特征的猪消化 道传染病．该病在我国及世界各养猪国家广泛分布，其对仔猪的危害严重，致死率高。 本实验对黑龙江省不同地区的5个腹泻病发生的猪场经临床初步诊断、实验室PCR 技术和病原分离．确诊其中的两个猪场为猪流行性腹泻。证明了黑龙江地区存在有猪流 行性腹泻．这两个葬猪场哺乳仔猪发病率为72．69％和89。95％，其他年龄猪为68．070／痢 75％；哺乳仔猪死亡率为62．ssYo和81．31％，其他年龄猪为8．31y痢10．37％：从发病年 龄看，虽然各种年龄的猪均有发生，但死亡多在4周龄以下哺乳仔猪：发病季节均为冬 春寒冷季节．临床表现以水样或稀薄黄白色蕨泻为主要特征。 本实验对PCR阳性的腹泻粪便样品进行了病毒分离。粪便毒在Veto细胞上进行连 续盲传。现已传20代次。在17代之前，赙染细胞无明显变化，在传至18代时，表现为 细胞轮廓不清。细胞颗粒增多．培养液中死亡细胞增多。并以每隔5个代次采用RT-nested PCR技术检测PEDVM基因，结果表明，在第5、10、15和20等不同代次的细胞培养 物进行的Nested-PCR均为阳性结果．说明分离毒确已在细胞中得到了稳定生长。该细胞 适应病毒的获得为我国PEDV地方分离株血清学、免疫学、病原生物学以及疫苗研制等 提供了重要的物质基础。 M基因的保守序列设计引物。通过 本研究根据C-enebank中PEDV删777和Brl／87 RT-PCR和Nested-PCR方法在我国首次从患病猪的粪便中扩增获得了我固地方株I．JB／03 M全基因序列。将其插入克囊袭体质粒pMDl8-T．并进行测序．测序结果显示LJB／03株 M基因核苷酸序列全长681bp，含有完整的开放阕读框架，编码226个氨基酸，将其核 苷酸序列及推导的氨基酸序列与已发表Brl／87和cv777两个国外同源标准毒株M基因 个援苷酸存在差异，周源性为98．09％；推导的氮基酸序列与Brl／87株和CV777株M 98．23％。而cv777 基因相比．分别有5个和4个氨基酸差异，同源性分别为97．79／捅11 和Brl／97M基因之间核苷酸序列仅有1个棱苷酸不同，同源性99．85％，推导的氨基酸 序列同瀑性99．56％．因此I．JB／03株与CV777和Brl，87M基因存在一定变异。 关键词猪流行性腹泻病毒；流行特征；Veto细胞培养特性；PEDVM基因生物学特性 V the Studieson Characteristicsof Epidemic Porcine DiarrheainSomeAreasof Epidemic HeiLongJiang andthe ofits Biological Properties Pathogen Abstract Porcine a disease ofswine diarrhea(PED)iscootaginus)enteric epidemic