细菌总论3-消毒灭菌与实验室安全.pptVIP

第三章 消毒灭菌与实验室生物安全 Disinfection and Biosafety 病原生物学教研室 　2、湿热灭菌法 ① 巴氏消毒法 (pasteurization) 61.1~62.8 ℃ 30min；71.7℃ 15~30s，牛奶、酒类消毒。 ② 煮沸法：一般细菌100℃5min , 芽胞1~2h；加入2％碳酸钠可提高沸点，又可防止金属器皿生锈，用于消毒食具/刀剪/注射器。 ③ 流动蒸汽消毒法： 100℃蒸汽 15~30min杀死细菌，但芽胞不能全部杀灭。 　2、湿热灭菌法 ④ 间歇蒸汽灭菌法 100 ℃蒸汽15~30min杀死繁殖体，孵箱37 ℃过夜；如此重复三次以上。适于不耐高热的含糖、牛奶等培养基。 ⑤ 高压蒸汽灭菌法 103.4kPa蒸汽压，121.3 ℃，15~20min.适于培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿热物品的灭菌。不能杀灭朊粒。 湿热与干热灭菌效果的比较 热型 温度(℃) 时间 布层内的温度(℃) 灭菌效果 （h） 20层 40层 100层 湿热 90～105.3 3 101 101 101.5 完 全 干热 130～140 4 86 72 70.5 不 完 全 相同温度下，湿热灭菌效果优于干热灭菌 （二）辐射灭菌法 电离辐射 非电离辐射 （三）滤过除菌法 主要适合于不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气的等的除菌。 不能滤过支原体、衣原体和病毒。 层流室 （五）干燥与低温抑菌法 干燥法常用于保存食物 低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存细菌菌种；冷冻真空干燥法是目前保存菌种的最好方法。 二、化学消毒灭菌法 化学消毒剂的杀菌机制： 促进菌体蛋白质变性或凝固 干扰细菌的酶系统和代谢 损伤菌细胞膜 第三节 消毒灭菌的应用 （一）高危器械物品； 所有这些物品都应该灭菌。 （二）中危器械物品； 采用消毒即可。 （三）低危器械物品； 一般用后清洗、消毒即可。 （四）快速周转的医疗器械； 影响消毒灭菌的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类与数量 温度 酸碱度 有机物 第四节、实验室生物安全 （一）病原微生物分类 （二）生物安全实验室防护水平分级 BSL-1 指普通建筑结构的实验室； BSL-2 应配备负压生物安全柜和高压蒸汽灭菌器等设备； BSL-3 实验室房间保持负压，有独立的送排风系统，排除的气需经高效过滤器过滤。 BSL-4 防护级别最高，配备生命支持系统，对实验室内部设施和外部环境都有更特殊的要求。 复习思考题 消毒灭菌的常用术语和常用方法。 简述湿热灭菌的原理和用途。 湿热灭菌有哪些方法？ 在温度和时间相同的条件下，为什么湿 热灭菌效果较干热灭菌效果好？ 简述紫外杀菌的作用机制。 常用化学消毒剂有哪些？简述其用途。 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施。 四级 对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。 三级 对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具有有效的预防和治疗措施。 二级 对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子。 一级 处理对象 级别 病原微生物实验室分级 BSL一、二级实验室不得从事高致病性病原微生物实验活动。 从事高致病性病原微生物相关实验活动应当有２名以上的工作人员共同进行。同一个独立安全区域内，只能同时从事一种高致病性病原微生物的相关实验活动。 (三)、实验室感染的控制 以及监督和法律责任 工作人员应掌握实验室技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能。应有符合要求的防护用品，建立健康档案；进行预防接种。 实验室应有科学、严格的管理制度，定期对实验室设施设备、材料等进行检查、维护和更新，应对废水、废气以及其他废物进行合理处置，防止环境污染。 * * 第一节 消毒灭菌的常用术语 灭菌 (sterilization) 利用理化因素杀死物体上所有微生物的过程，包括芽胞/病毒/真菌/细菌等。 消毒 (disinfection) 杀死物体或环境中病原微生物的措施，并不一定能杀死细菌芽胞或非