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安肠汤对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜组织中内源性代谢物的影响1 1* 2 2 2 1 1 1 1 孙平良 ，耿曙光 ，袁代解 ，杨光 ，付 军 ，黄 艳 ，文亦磊 ，肖振球 （1.广西中医药大学第一附属医院，广西壮族自治区南宁市东葛路89-9号，530023；2.广 西中医药大学） [摘要] 目的：应用代谢组学方法对安肠汤干预溃疡性结肠炎 （UC)大鼠的作用机制进行相 关研究。方法：将76只健康大鼠随机分为空白组 （4只）、模型组 （12只）、阳性药物对 照组 （24只）、安肠汤低、中、高剂量组 （各12只）分5、10、15天三个时间点对大鼠 结肠粘膜组织进行GC-MS检测，对采集数据进行多元统计分析(PCA，PLS- DA,OPLS-DA)， 采用 t 检验并结合 OPLS-DA 模型第一主成分的VIP (Variable Importance in the Projection)值来寻找差异性表达代谢物并对其相对含量及代谢途径进行分析。结果：将得 到的色谱图与质谱库进行匹配鉴定，最终得到准确定性的化合物47个。多元统计分析后得 到的得分图显示第二个时间点 （第10天）模型最为成功，大鼠模型安肠汤中药治疗组效果 总体优于阳性药物对照组，安肠汤治疗组中中剂量治疗组优于低、高剂量组。分析后最终 得到11个潜在代谢标志物，分别为尿苷、牛磺酸、甘氨酸、苏氨酸、乳酸、β-丙氨酸、 肌氨酸、甘露糖、木糖、葡萄糖、蔗果三糖，可作为UC的潜在标志物；相对模型组，阳性 药物对照组有10种代谢物显示回调，而安肠汤治疗组11种代谢物均显示表达回调且回调 幅度更为明显(P0.05)；安肠汤治疗组中中剂量组的回调幅度优于低、高剂量组。结论： 11种内源性代谢物可作为UC 的潜在标志物，安肠汤对这11种代谢物的调节作用可能是安 肠汤防治UC 的途径和机制。 [关键词]安肠汤；溃疡性结肠炎；代谢组学 溃疡性结肠炎 （ulcerative colitis，UC）是一种累及直肠和结肠黏膜的慢性非特异 性炎症性疾病,其病因和发病机制至今尚未明确,目前认为可能与免疫因素、环境因素、易 [1] 感基因、肠道菌群等多种因素相互作用有关 。代谢组学是通过考察生物体系受刺激或扰 [2] 动后其代谢产物的变化来研究生物体系代谢途径的一种技术 ,其以组群指标为基础的特点 与中医的 “整体观”类似，同时具有方法客观、无歧视地反应生物机体的整体功能状态的 [3] 特点，是目前评价中医药复方作用机制的最有效途径之一 。安肠汤是课题组在多年临床 经验的基础上总结出治疗UC 的中药复方，从 1990年开始临床研究至今，取得了较好疗 [4-6] 效，无明显毒副作用 。本研究以UC模型大鼠结肠内源性代谢物的变化规律为切入点， 采用基于气相色谱-质谱联用(GC-MS) 技术的代谢组学方法分析安肠汤干预治疗UC 的可能 生物学机制。 1 材料与方法 1.1实验动物 健康SPF级Wistar大鼠76只，雄雌各半，8周龄，体重180g～220g，实验动物许可 证号：SCXK桂2014-20002，由广西医科大学试验动物中心提供。 1.2试验药物 安肠汤组成：党参15g，干姜10g，白术10g，白头翁15g ，茯苓15g，补骨脂25g， 黄芪20g，槟榔15g，熟附子15g，鸡内金10g，薏苡仁10g，木香10g，地榆 15g，赤芍 15g，延胡索10g，甘草10g，温水浸泡30min，水煎3次，浓缩至1ml含生药量5g水溶 液，4℃保存备用。丽珠肠乐 （批号，珠海丽珠集团丽珠制药厂；美沙拉嗪肠 溶片 （批号：120809），葵花药业集团佳木斯鹿灵制药有限公司。 1.3主要试剂和仪器 基金项目：国家自然科学基金项目 ；广西自然科学基金项目 （2013GXNSFAA019127）；广 西中药药效研究重点实验室项目 （KTJ13009） *通讯作者：sunpl2000@163.com 水合氯醛 （批号国药集团化学试剂有限公